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CL-APC和APC到底有什么区别？
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大家好，我是流式荧光崔工，一个旨在链接与流式荧光相关的朋友，一起赚钱、一起学习、一起工作、一起生活的靓仔。 前面的文章据说80%以上的抗体都是他们家筛选的？ 写了崔工跟一个潜在合作商的聊天。 有读者发崔工微信说，这对搞研发的来说是一个致命的打击，还怎么让他们活。 崔工觉得，早一点通过崔工这个账号了解到有这么一家公司存在，他们干比你自己干可以节约时间上的成本，可以节约资金，可以提高效率。 避免了大量时间和资金投入后还没有别人干得好的悲剧，早一点认识到自己的不足，早一点认清现实，调整方向，未必不是一个好事。 也有读者留言说，不太相信每年可以筛选出10个那么多的抗体。 信与不信，没有对错，不会产生什么影响。 接下来你的行为才会有对应的结果和回报。 — 1 — 今天有位老师向崔工咨询交联APC（又叫cross link APC，简写为CL-APC）和普通的APC有什么区别？ 其实从荧光的角度来说，CL-APC和APC没有很大的本质区别。 在分子量、基团、摩尔吸光系数、EM、EX上没有什么区别。 它们的分子量都是104KD。 最大吸收峰：652；±2 nm 荧光发射峰：662；±2 nm 图片 摩尔吸光系数7.3*100000M-1cm-1。 量子产率0.68。 产品形态冻干粉、沉淀都有。 但价格相差很多，CL-APC差不多是普通APC的2倍以上。 这些基本的东西既然都差不多，那价格为什么会相差那么多，它们到底有什么区别呢？我们又如何来选择使用呢？ 这就要从它们的结构上说了，也是它们之间唯一不一样的地方。 它们的分子结构为通过硫醚键连接的载体蛋白与开链线性延展的四咯化合物。 它的子结构里边由蛋白的亚基组成，这个亚基为(alpha-beta)3。 每个 alpha-亚基和 beta-亚基约为17KD。 我们平常所说的这个CL-APC，就是把α和β这两条链，通过化学反应的办法把它们连在一起。 这就是CL-APC与APC的区别，也是唯一的区别。 那这个唯一的区别对后期的使用会产生什么样的影响？ 我们可以用一张图来辅助说明。 图片 这是用Naclo4分别对CL-APC和APC的影响图。 红色的是没有加Naclo4的图，蓝色的是加了Naclo4后的图。 Naclo4是一种可以使蛋白变性的一种盐，所以我们看到在这个高盐的情况下。 APC的吸收会有所下降，大概降低到了620，而CL-APC在这种高盐的情况下，它的这个吸收几乎没有变化。 也就是说CL-APC比APC稳定性要好，它的结构不易发生改变。 从图看CL-APC要比APC要好，那到底用那种来进行抗体标记呢？ 用以前的文章中的话来说，最好的不一定是最适合的，最适合的才是最好的。 酒虽好，但不能贪杯，贪杯了你就会收到伤害。 在你的标记工艺、存储体系、环境中是否有影响到APC不稳定的因素，比如高盐，高温等。 如果有那选择CL-APC，如果没有就用APC就可以了。 今天的文章就分享到这，如果今天的文章对您有一点点帮忙或一丝丝的启发，欢迎帮忙点个在看和转发，也可加崔工微信进一步交流沟通。 |
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