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【求助】关于荧光标记DNA修饰的纳米金颗粒-荧光淬灭与恢复的问题
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思路：通过在纳米金表面修饰其中一个单链带有染料的dsDNA来淬灭染料的荧光，当加入与capture dna互补的靶序列后，靶序列与带有染料的序列竞争，使带有染料的序列脱落，从而释放荧光。 问题：我使用了 10nM，40nm的AuNP，50uM，8uL的dsDNA，染料用的是cy5.5，通过冻融法把dsDNA修饰到了AuNP表面，解冻离心后的纳米金呈紫红色，没有聚集。紫外显示吸收峰波长红移了4nm但是浓度大大减少了（大概只有3nM），dls显示颗粒大小增加了大约20nm。荧光光谱显示被修饰后的纳米金在放射波长还有一些荧光没有完全淬灭。当我在20uL的DNA-AuNP中加入了20uL，100nM的靶标dna后，荧光并没有恢复多少，甚至还更淬灭了一点。请问有没有大佬知道这是什么原因啊？按理来说荧光水平会大大提升不是吗？ 我是新人，十分感谢能够为我解答的大佬！ 发自小木虫IOS客户端 |
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