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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 人肝脂肪酸转运蛋白和NBD胆固醇无法结合，求助应该怎么办
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nfkjdx123

新虫 (初入文坛)

[求助] 人肝脂肪酸转运蛋白和NBD胆固醇无法结合，求助应该怎么办

正在做NBD胆固醇和人FABP1的解离常数测定，人FABP1的浓度为200nM，NBD胆固醇浓度从40-10000nM，但是相对于空白对照组（buffer+探针），并没有观察到荧光强度的增强，即NBD胆固醇和人FABP1并没有发生结合，和文献不符。我的buffer使用的是30mM Tris-HCl 100mM NaCl ph=7.8，温度37℃，孵育一小时，探针NBD胆固醇经过质谱和光谱最适宜激发波长测试，应该也没问题。求问这样的情况常见吗？会是蛋白的问题吗？会是反复冻融造成蛋白都失活了吗？

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1楼 2023-04-07 10:22:55
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