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小心点

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助】乳酸菌质粒提取问题

我在做野生植物乳杆菌质粒提取的时候,总是会出现附件图片这种情况。我怀疑是蛋白杂质问题,但是我已做过两次酚氯仿抽提,如果酚氯仿抽提次数增多的话,质粒浓度也会大大下降,不利于后续操作。请问高手怎么样能把杂质处理干净,提取更纯净的质粒?谢谢。
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lwb1987521

木虫 (正式写手)

这个问题嘛 要专业的人士 我来帮你定下贴 顺便占个沙发 呵呵
2楼2009-09-24 16:51:37
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小心点

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by lwb1987521 at 2009-9-24 16:51:
这个问题嘛 要专业的人士 我来帮你定下贴 顺便占个沙发 呵呵

呵呵,谢谢,等高手
3楼2009-09-24 16:58:16
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黑翼天使

木虫 (小有名气)

★ ★
小心点(金币+2,VIP+0): 9-29 20:43
一般这种情况是蛋白质污染问题,可能是乳酸菌太多了,你减少量试一下,别忘了加溶菌酶啊!
4楼2009-09-24 22:59:44
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科子

木虫 (著名写手)

我不懂这方面的知识,你到别的版块去咨询下哟可能会更好,只能帮你顶下贴了。
5楼2009-09-25 13:56:49
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黑翼天使

木虫 (小有名气)


hawkyin(金币+1,VIP+0):谢谢回帖交流! 1-19 11:11
用试剂盒,可以用宝生物的,别忘了在裂解菌的时候加溶菌酶。最好不用天根的,手提也可以,看看《乳酸菌质粒 DNA高效快速提取方法的建立》这篇食品工业科技上的论文就行。
6楼2009-09-26 00:13:33
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wordsworth3180

木虫 (正式写手)

那篇文章连多少毫升的菌液都没说
7楼2009-09-26 15:43:20
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小心点

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 黑翼天使 at 2009-9-24 22:59:
一般这种情况是蛋白质污染问题,可能是乳酸菌太多了,你减少量试一下,别忘了加溶菌酶啊!

不多啊,过夜培养的3ml菌液,1,5EP管提的,本来质粒浓度就够淡,太少就更提不出来了。
溶菌酶每次都加的,10mg/ml,处理5h。
8楼2009-09-26 20:46:40
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小心点

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 科子 at 2009-9-25 13:56:
我不懂这方面的知识,你到别的版块去咨询下哟可能会更好,只能帮你顶下贴了。

谢谢~
9楼2009-09-26 20:47:11
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惊蛰赵

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 小心点 at 2009-9-26 20:46:

不多啊,过夜培养的3ml菌液,1,5EP管提的,本来质粒浓度就够淡,太少就更提不出来了。
溶菌酶每次都加的,10mg/ml,处理5h。

溶菌酶做好水浴过夜 20mg/ml
感觉快乐就忙东忙西,感觉累了就放空自己!
10楼2010-01-19 09:45:38
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