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蝶谷医仙

新虫 (小有名气)

[交流] PCR的阴,阳性对照怎么设?

实验是检验因子a对细胞基因b表达的影响,用qPCR方法检验。已知基因b在细胞中是肯定表达的,请问大家该实验的阴,阳性对照应该用什么?必须是同一种动物的细胞吗?具体操作时是否像内参一样与样本一对一放入96well plate,同时跑?这样岂不是有很庞大的数据必须分析,且要浪费很多试剂。恳请高手指点。

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-26 at 10:08 ]
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bioxixi

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
阴性、阳性各设一个吧,a肯定是有不同浓度的吧,那用0浓度做阴性对照可以把,既然b肯定有表达,做一个就行了,主要是看变化嘛
3楼2009-09-24 10:10:20
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nicknelson

至尊木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
阴性对照:把模板换成水
阳性对照:模板为肯定能扩出片段的,含有目的基因的质粒或其它等。
2楼2009-09-24 09:30:06
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zuodongyun

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
阴性和阳性对照各做一个就行了,阴性对照用0浓度处理细胞作为模板,阳性对照以最佳浓度处理的细胞作为模板
4楼2009-09-24 11:59:44
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