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求细胞裂解液的配制方法
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missu
金虫
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虫号: 664175
注册: 2008-11-29
专业: 蛋白质组学
★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
SDS 是十二烷基硫酸钠,一种强银离子的去污剂
如果细胞裂解液中含有SDS的话,裂解液中的蛋白质会变性的
你裂解的目的如果是提取蛋白质,建议不要用SDS,改用Triton X-100,一种较温和的去污剂。当然,如果是提取质粒之类的那就无所谓了。
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11楼
2009-10-13 12:33:02
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zier1011
木虫
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虫号: 796939
注册: 2009-06-19
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MM
专业: 微生物
SDS:蛋白变性剂
SDS是阴离子去污剂,作为变性剂和助溶试剂,它能断裂分子内和分子间的氢键,使分子去折叠,破坏蛋白分子的二。三级结构。而强还原剂如巯基乙醇,二硫苏糖醇能使绊胱氨酸残基间的二硫键断裂。在样品和凝胶中加入还原剂和SDS后,分子被解聚成多肽链,解聚后的氨基酸侧链和SDS结合成蛋白- SDS胶束,所带的负电荷大大超过了蛋白原有的蛋白量,这样就消除了不同分子间的电荷差异和结构差异。
SDS-PAGE一般采用的是不连续缓冲系统,于连续缓冲系统相比,能够有较高的分辨率。
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花还香香的
12楼
2009-10-15 11:22:15
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