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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助：关于pcr产物纯化
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梧桐眼

金虫 (著名写手)

[交流] 求助：关于pcr产物纯化

PCR后电泳能够看到明亮的条带 大约1000bp左右 ，然后使用试剂盒纯化后就看不到条带了 ！  可能是啥原因。纯化试剂盒是 UNIQ-10柱式DNA胶回收试剂盒 。


                            谢谢  祝好！
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1楼 2009-09-22 10:04:26
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bioxixi

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
首先问一下这个柱子以前用过吗？要是第一次用，先检查试剂是不是加全了，比如有的需要加乙醇之类的没有忘记吧
胶一定要充分融化，再就是最好洗的时候可以把洗脱缓冲液预热一下，增加洗的时间，再就是把洗脱的溶液加到柱子上再洗一次，这样洗脱效率会有很大的提高。
只要柱子的膜和试剂没问题，应该不会出错的，再试一次吧
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9楼2009-09-22 13:21:48
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wangxiaoli8216

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
是切胶后纯化的还是直接纯化的呢？如果是切胶纯化的话，有可能切胶没切好；如果PCR产物是单一条带，可以直接用PCR产物纯化试剂盒。
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2楼2009-09-22 10:30:30
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飞侠8683

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
也有可能是与柱子结合太紧，洗不下来
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3楼2009-09-22 10:43:43
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gastrodia

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+3,VIP+0): 9-22 20:23
试剂盒纯化后看不到条带？你电泳上样量是多少，洗脱体积大，上样量太小就看不出来，曝光的时间加大一些，如果加大上样量也看不到条带，你回收的时候有问题
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4楼2009-09-22 10:48:41
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