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梧桐眼

金虫 (著名写手)

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[交流] 求助：关于pcr产物纯化

PCR后电泳能够看到明亮的条带大约1000bp左右，然后使用试剂盒纯化后就看不到条带了！可能是啥原因。纯化试剂盒是 UNIQ-10柱式DNA胶回收试剂盒。

谢谢祝好！

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1楼 2009-09-22 10:04:26

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tangtl

木虫 (正式写手)

小木虫潜水者

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★
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是切胶试剂盒还是枝节 pcr产物回收试剂盒。这两种我都用过。都行的。如果是1000bp。溶胶的时候注意点。时间长点。中途涡旋一下。就好了。

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13楼2009-09-24 08:54:18

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wangxiaoli8216

木虫 (小有名气)

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专业: 质谱分析

★
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是切胶后纯化的还是直接纯化的呢？如果是切胶纯化的话，有可能切胶没切好；如果PCR产物是单一条带，可以直接用PCR产物纯化试剂盒。

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2楼2009-09-22 10:30:30

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飞侠8683

新虫 (小有名气)

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专业: 生物大分子结构与功能

★
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也有可能是与柱子结合太紧，洗不下来

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3楼2009-09-22 10:43:43

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gastrodia

金虫 (正式写手)

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专业: 微生物遗传育种学

★ ★ ★ ★
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amisking(金币+3,VIP+0): 9-22 20:23

试剂盒纯化后看不到条带？你电泳上样量是多少，洗脱体积大，上样量太小就看不出来，曝光的时间加大一些，如果加大上样量也看不到条带，你回收的时候有问题

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4楼2009-09-22 10:48:41

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