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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教关于测序结果的问题
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gastrodia

金虫 (正式写手)
★ ★
yidaqunyan(金币+2,VIP+0):谢谢您，希望以后还能得到您的指导 9-23 11:58
很难说，如果你是一次PCR的结果，但是我建议你把上面的亮带和450bp左右的都做克隆测序，当然是在你们老板不是很吝啬钱的情况下，如果你不确定，设计一对内引物，用第一次PCR的原液稀释50倍作为模板进行二次扩增通常会得到目的条带，
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11楼2009-09-23 10:30:11
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yaoyl0679

金虫 (正式写手)
★ ★
yidaqunyan(金币+2,VIP+0):谢谢老师，希望以后还能得到老师的指点 9-23 12:01
现在PCR扩增片段大小应该是可以估计的，如果是400bp大小的话，那么没有必要延伸1.5min。
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12楼2009-09-23 11:14:15
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yidaqunyan

木虫 (正式写手)

博士
引用回帖:
Originally posted by gastrodia at 2009-9-23 10:30:
很难说，如果你是一次PCR的结果，但是我建议你把上面的亮带和450bp左右的都做克隆测序，当然是在你们老板不是很吝啬钱的情况下，如果你不确定，设计一对内引物，用第一次PCR的原液稀释50倍作为模板进行二次扩增通 ...

对了，老师，我突然想到，我是用普通的最便宜的taq酶，您看换作高保真的taq酶会不会好一点呢？
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不孝有三，读博为大！
13楼2009-10-09 13:17:30
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salooloo001

至尊木虫 (文坛精英)
路过
学习不少啊
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14楼2009-10-09 13:17:51
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