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bluewhale7750

新虫 (初入文坛)

[交流] 求助!聚丙烯酰胺电泳

我做的是AFLP,跑的电泳为什么只到中间就下不去了呢?无论多长时间都不行,而且带发暗。急求助!谢谢!

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-27 at 22:15 ]
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
(1)估计是凝胶问题,我一般在37℃ 凝固 20-30min,就可以跑胶,
从来没出现过你说的问题啊。

(2)你的胶有多长啊?8CM的分离胶?另外一种可能是你的电泳Buffer中的离子浓度太高了,这个跑长了以后就会有跑不动胶啊

(3)样品处理问题。跑胶的样品中不应含有较高的盐,例如硫酸铵、磷酸盐或NaCl等。

[ Last edited by HarveyWang on 2009-9-22 at 10:32 ]
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
2楼2009-09-22 10:31:20
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changes

木虫 (正式写手)

可能原因较多。
1.胶的问题,仔细检查配胶过程,保证药品没加错。
2.玻璃板换套新的试试,没有压过的,一直是平放的。
3.边条厚度一致。
3楼2009-09-22 10:56:31
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bluewhale7750

新虫 (初入文坛)

谢谢了,我在试试
4楼2009-09-22 15:17:46
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qqsvery

木虫 (著名写手)

我是来学习的,你做DNA标记用聚丙烯酰胺?不用琼脂糖?
谎言和真实在河边洗澡,谎言先洗好,穿走了真实的衣服,真实却不肯穿谎言的衣服。后来人们眼里只有穿着真实衣服的谎言,却很难接受赤裸裸的真实。
5楼2009-09-23 13:57:56
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qqsvery

木虫 (著名写手)

你的胶分浓缩胶和分离胶吗?是怎么做的胶?
谎言和真实在河边洗澡,谎言先洗好,穿走了真实的衣服,真实却不肯穿谎言的衣服。后来人们眼里只有穿着真实衣服的谎言,却很难接受赤裸裸的真实。
6楼2009-09-23 13:58:59
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695

木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
恩,这样子只能考虑胶和板子的问题了,条带也不是很清晰,做好银染和后边的工作,我做了2年的AFLP,楼主加油!
7楼2009-09-23 16:30:46
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月月大可

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
看看是不是电泳液漏到外槽了,导致电路无法接通,所以跑了一半就停了。
8楼2009-09-23 19:37:29
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