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青青草hwj

铁虫 (小有名气)

[交流] 请大家分析下怎么回事?急啊

各位虫友们好啊。
   最近在做核酸的聚丙烯酰胺凝胶电泳,效果总是不好啊,Marker跑不开,我用的是两千的,前面几个间隔近的跑不开,用的电泳是95伏,都跑两小时了还不行。PCR扩增出的条带也比较粗啊,到底怎么回事啊?做了快两个月了,没什么好看的条带啊!好急的
   多谢各位的帮忙啊

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-20 at 11:48 ]
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)


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你跑的是琼脂糖凝胶,不是SDS-Page吧?
2楼2009-09-20 10:32:58
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qqsvery

木虫 (著名写手)

★ ★
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350784478(金币+1,VIP+0):谢谢参与 9-20 11:50
电压太小了吧!时间要这么久?!你跑的是DNA还是蛋白质?我们做全基因组检测的都是160的电压,跑15分钟就ok了,立马做成像,效果很好的,天天做。
谎言和真实在河边洗澡,谎言先洗好,穿走了真实的衣服,真实却不肯穿谎言的衣服。后来人们眼里只有穿着真实衣服的谎言,却很难接受赤裸裸的真实。
3楼2009-09-20 10:52:13
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


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为什么要跑PAGE而不是Agarose呢?
4楼2009-09-20 11:35:43
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anik

银虫 (正式写手)

PAGE你可以增大点电压,没事的。
Marker没有跑开估计就是跑得时间太短,指示剂跑到一定的位置才可以的。另外,也可能与你的缓冲液有关,重新配制新的缓冲液。。。。
5楼2009-09-20 12:13:15
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菊花茶

木虫 (著名写手)


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聚丙烯用95伏的电泳,楼主你没打错吧?
6楼2009-09-20 12:16:40
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小瞥

铁虫 (小有名气)

加大电压,这是很必要的
7楼2009-09-20 13:41:46
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青青草hwj

铁虫 (小有名气)

我用的是小槽的,电压不能超过95伏啊
我们老师说用聚丙烯酰胺凝胶电泳分辨力高些
怎么回事?
8楼2009-09-20 15:15:57
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hong303030

金虫 (小有名气)


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我们都是用的80伏电压,可能会是胶的问题,你重新配一下PAGE,试一下
9楼2009-09-20 15:39:17
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青青草hwj

铁虫 (小有名气)

我重新配过,还是不是很好,不知道怎么回事?有其他原因么?会不会是新买的电泳仪电源的问题?
    谢谢各位哦
10楼2009-09-20 17:18:56
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