版块导航: 正在加载中...

客户端APP下载

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

2

当前主题已经存档。

墨香若水

木虫 (著名写手)

小小囧虫

应助: 15 (小学生)
金币: 3059.1
散金: 942
红花: 10
沙发: 1
帖子: 1408
在线: 255.2小时
虫号: 528502
注册: 2008-03-19
性别: GG
专业: 生物化学

不纯化

连接buffer不能反复冻融，里面的dATP会降解，T4酶有没有问题啊

仕不可不弘毅，任重而道远

11楼2009-09-20 11:05:33

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

spiderboy

金虫 (正式写手)

BioEPI: 1
应助: 10 (幼儿园)
金币: 883.9
散金: 63
红花: 3
帖子: 478
在线: 79.9小时
虫号: 464778
注册: 2007-11-21
专业: 生物化学

上面说了，我做过纯化，因为不纯化转化效率低。不过对于常用的那些质粒载体不纯化也是可以有较好的结果的。。。。

12楼2009-09-20 13:08:26

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

smallcat227

木虫 (著名写手)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 9746
散金: 2016
帖子: 1238
在线: 104.7小时
虫号: 502444
注册: 2008-02-14
专业: 环境微生物学

★
huangdi07(金币+1,VIP+0): 9-20 16:46

当然最好是纯化，不过不纯化也不会完全不长斑，你酶联的时候质粒和片段的比例是多少，建议质粒少加

13楼2009-09-20 15:30:39

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

怡然之昀

木虫 (正式写手)

应助: 3 (幼儿园)
金币: 6834.5
散金: 2
红花: 1
帖子: 856
在线: 202小时
虫号: 277088
注册: 2006-09-03
性别: MM
专业: 分离过程

我用TAKARA的，一直加A后不纯化，挺好的都

14楼2009-09-20 16:17:59

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

huangdi07

铁杆木虫 (小有名气)

应助: 9 (幼儿园)
金币: 5493.5
散金: 27
红花: 1
帖子: 258
在线: 141.9小时
虫号: 639394
注册: 2008-10-28
专业: 微生物遗传育种学

我加的t载体是1ul，大概10ng，加的pcr片段大约为30ng，它们的摩尔比大概为7：1，用得是全式金的T-easy载体

15楼2009-09-20 16:47:52

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

qqsvery

木虫 (著名写手)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 2895.9
红花: 3
帖子: 1688
在线: 18.6小时
虫号: 592166
注册: 2008-09-03
专业: 造血、造血调控与造血微环

★ ★
amisking(金币+2,VIP+0):好好学习！ 9-20 18:38

我是来学习的！

谎言和真实在河边洗澡，谎言先洗好，穿走了真实的衣服，真实却不肯穿谎言的衣服。后来人们眼里只有穿着真实衣服的谎言，却很难接受赤裸裸的真实。

16楼2009-09-20 18:28:47

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

艾嘉

应助: (幼儿园)
在线:
虫号: 809606

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

最近我也遇到了这样的问题，要不不长斑，要不就全蓝斑，重复三遍都这样。片段浓度高点有没有影响？

赞一下(1人)

17楼2009-09-20 22:43:24

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

huangdi07

铁杆木虫 (小有名气)

应助: 9 (幼儿园)
金币: 5493.5
散金: 27
红花: 1
帖子: 258
在线: 141.9小时
虫号: 639394
注册: 2008-10-28
专业: 微生物遗传育种学

回复五楼

全试金的载体是酶和buffer的混合液，另外我用这个载体，挑的很多白斑都是假阳性，不知道原因，我用puc做阳性对照，长出的是蓝斑

18楼2009-09-21 08:49:57

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

相关版块跳转我要订阅楼主 huangdi07 的主题更新

2