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wwtp

铜虫 (小有名气)

[交流] 求溶解细胞膜和细胞壁的试剂或方法

我是想把溶液中的细菌或真菌全部打碎,让细胞内的物质释放出来。高人帮个忙!谢谢

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-21 at 13:55 ]
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wei20056

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
amisking(金币+3,VIP+0): 9-19 19:45
2楼2009-09-19 17:31:20
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wei20056

金虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
amisking(金币+5,VIP+0): 9-19 19:45
wwtp(金币+35,VIP+0): 9-20 20:05
超声波处理(Ultrasonication)既利用超声加热的方法,把细胞破碎。但这种处理会导致DNA 的断裂,所以加热不宜过剧烈,要设定好超声时间和间隙时间,一般超声时间不超过5秒,间隙时间最好大于超声时间,这些都有利于保护酶的活性。bead-beating 也是常用的机械处理方式,有报道指出bead-beating 比热休克和化学裂解的细胞裂解效果更好 虽然DNA产量较高,但通常得到的DNA片段较小。
3楼2009-09-19 17:48:11
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firefly75

木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★
amisking(金币+2,VIP+0): 9-20 07:29
wwtp(金币+2,VIP+0): 9-20 20:06
一般来说较剧烈的有超声、机械破碎,温和的还是选择溶菌酶的方法,还有冻融法,方法很多的。^_^
4楼2009-09-19 17:56:36
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)

★ ★ ★
amisking(金币+1,VIP+0): 9-20 07:29
wwtp(金币+2,VIP+0): 9-20 20:06
溶菌酶,SDS;压榨机进行压榨;液氮等都可以吧!
5楼2009-09-19 21:59:59
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夜阑卧听雨

金虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
amisking(金币+2,VIP+0): 9-20 07:29
wwtp(金币+2,VIP+0): 9-20 20:06
用液氮冷冻搅碎就可以,也可以用超声处理,有专用的超声破碎机,也可以用生物方法,酶之类的
6楼2009-09-19 23:31:36
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wangqk198738

金虫 (正式写手)

Triton X-100

★ ★
amisking(金币+1,VIP+0): 9-20 07:29
wwtp(金币+1,VIP+0): 9-20 20:07
Triton X-100破坏膜但不损伤蛋白质等。
7楼2009-09-20 07:04:35
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zhhl1981

木虫 (著名写手)


wwtp(金币+1,VIP+0): 9-20 20:07
溶菌酶,匀浆破碎仪,珠磨法,液氮,超声等等
8楼2009-09-20 09:12:49
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艾嘉

★ ★ ★ ★ ★
wwtp(金币+5,VIP+0):有经验呀?交流一下吧 9-21 11:15
我们前段时间就先把菌体细胞冻融,在加溶菌酶,然后超声,效果不错,呵呵
9楼2009-09-21 00:45:21
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