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Silence_D

新虫 (初入文坛)

[求助] 化学修饰热启动酶未能完全修饰 已有1人参与

柠康酐对taq酶进行热启动修饰,完了pcr测活性:每个反应体系加10U修饰过的热启动酶,分别进行95℃处理15min、1min,结果1min处理的p出的条带也很亮。大家有什么方向可以优化吗?

@biostar2009 发自小木虫Android客户端
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
修饰的流程是什么样的? 含有Tris溶液吗?
行至水穷处,坐看云起时
2楼2023-02-22 20:50:45
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Silence_D

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by pennchem at 2023-02-22 20:50:45
修饰的流程是什么样的? 含有Tris溶液吗?

10u/ul的taq酶,碳缓。想换tris试试。

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3楼2023-02-23 10:49:58
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Silence_D

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by pennchem at 2023-02-22 20:50:45
修饰的流程是什么样的? 含有Tris溶液吗?

10u/ul的taq酶以1/80的体积比加入酸酐,rt混合过夜,再4℃静置6h。碳缓。想换tris试试。

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4楼2023-02-23 10:52:08
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