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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 流式细胞仪检测荧光的重复性好差怎么办？
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醉醉葡萄

新虫 (初入文坛)

[求助] 流式细胞仪检测荧光的重复性好差怎么办？ 已有1人参与

同一种细菌发酵72h，我用同样的处理条件处理，两次流式出来的荧光直方图为啥差那么多，第一次在2600左右，各组的平行也很好；第二次mean fluorescence变成了7000，各组平行的波动也很大，荧光直方图也开始分叉了。
有没有做流式的大神555，可能的原因是什么呀，我想了一下是否是因为操作问题，我两次操作唯一有区别的就是第一次离心是8000g,10min,这次时间比较赶就用了10000g,5min,这个影响大吗？
两次未染色的影响对照值倒是一样的。@gyesang
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1楼 2023-02-20 20:40:51
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醉醉葡萄

新虫 (初入文坛)
流式细胞仪检测荧光的重复性好差怎么办？

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2楼2023-02-20 20:45:03
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醉醉葡萄

新虫 (初入文坛)
流式细胞仪检测荧光的重复性好差怎么办？-1

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3楼2023-02-20 20:45:28
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小小-

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

1.从图像上直观分析，好像两次测试时仪器测量参数不同，左侧的对照，第一次比第二次纵坐标高，比右侧的FITC染色组也高出一部分，第二次对照和染色组位置纵坐标位置接近很多；
2.准备两份一样的离心条件，重复测量验证一下离心的影响。
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春种夏长，秋收冬藏
4楼2023-03-07 08:51:02
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