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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助！！！真菌RNA的提取方法
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zuodongyun

铁杆木虫 (正式写手)
★
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真菌RNA 可以用TRIzol提取，只不过糖的污染比较多，是细胞壁的含糖量比较多，可以用LiCl沉淀，效果会好一点
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11楼2009-09-19 09:55:07
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changes

木虫 (正式写手)
★
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引用回帖:
Originally posted by 陈思容 at 2009-9-18 14:51:
恩，周末先试着用异硫酸氰胍法做下吧！还有就是关于PCR产物的测序问题，师姐说是要用到M13，有人说T载体，总之我不知道PCR完了以后到底是怎么测序的

你是PCR产物直接测序？能保证是单一条带？直接测序效果差一些，引物序列及前面的一些序列可能就没有了。
还是将PCR产物纯化后，连T载体再测序吧，那时就看T载体上的引物序列了，一般都有M13引物的。
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12楼2009-09-19 10:02:03
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陈思容

铜虫 (正式写手)
谢谢，一步步来吧
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13楼2009-09-21 14:26:59
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陈思容

铜虫 (正式写手)
，和导师再商量一下吧！
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14楼2009-09-21 14:28:09
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caicaiyy

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我用的是Ttrizol法，效果不错。提醒你提了RNA之后要立即做反转入，不然你提的 RNA放冰箱过一两天就被降解了，CDNA可以保存很久的。
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15楼2009-10-07 14:25:00
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linxi8579

铜虫 (正式写手)
★
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引用回帖:
Originally posted by 陈思容 at 2009-9-18 14:10:
试剂盒，我也想用啊！周围实验室大都用，我们老板很反感用试剂盒之类的东西！没办法，只有配溶液自己提了！脱水的话没有其他方法吗，实验室抽滤机不好用

脱水没有抽滤机，还可以用硅胶粉。在培养皿里上面再铺上滤纸，用牙签操作。效果还行吧。去水不好的话，液氮研磨效果也很不好的哦。试剂盒操作方便并且提的也干净，我想你应该争取一下。
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16楼2009-10-07 15:00:14
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linxi8579

铜虫 (正式写手)
据说RNA提出来放-80还是可以较长时间保存的。
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17楼2009-10-07 15:03:06
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陈思容

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by linxi8579 at 2009-10-7 15:00:


脱水没有抽滤机，还可以用硅胶粉。在培养皿里上面再铺上滤纸，用牙签操作。效果还行吧。去水不好的话，液氮研磨效果也很不好的哦。试剂盒操作方便并且提的也干净，我想你应该争取一下。

非常感谢，你也是做这方面课题的吗？
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18楼2009-10-08 10:30:00
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jjlbest

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
液氮研磨的方法提取的效果比较好，感觉比试剂盒要好。
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19楼2009-10-08 13:05:20
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陈思容

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by jjlbest at 2009-10-8 13:05:
液氮研磨的方法提取的效果比较好，感觉比试剂盒要好。

那么用石英砂研磨呢
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20楼2009-10-08 13:59:05
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