| 查看: 888 | 回复: 5 | ||||
[交流]
蛋白抗原表位预测及抗原多肽设计
|
||||
|
一、抗原多肽选择的基本原则 1、尽可能是在蛋白表面 2、保证该段序列不形成α-helix 3、N,C端的肽段比中间的肽段更好 4、避免蛋白内部重复或接近重复段的序列 5、避免同源性太强的肽段 6、交联可以交联在N，C两端，选择依据就是交联在对产生抗体不太重要的一端 7、序列中不能有太多的Pro,但有一两个Pro有好处，可以使肽链结构相对稳定一些，对产生特异性抗体有益。 二、抗原多肽设计的基本原则 为了使生产抗体获得最佳效果，仔细地设计抗原多肽是很有必要的，设计应满足一个基本条件：在免疫过程中，该抗原既不会产生过强的免疫反应，同时又能产生出对感兴趣的蛋白有结合能力的抗体。尽管抗原设计是一个很复杂的课题，有诸多需要注意的细节，已超过了我们所能提供的范围，根据我们所积累的经验，有几点关键的基本设计原则可以提供给大家参考： 1、确定抗体的用途（应用）新开展一个研究项目，弄清楚所感兴趣的蛋白的一些基本特性是很有必要的，特别是如果知道蛋白的结构会对选择抗体易于接触和识别的识别区域有很大的帮助。然而，在没有这样精确的结构信息（多数是这种情况）的情况下，了解研究的用途（应用）会影响多肽设计的策略。例如：如果研究重点是集中在蛋白的不同区域，如C端或N端，或在一种特定状态下的蛋白，如磷酸化等，那么按照所需序列设计的多肽和产生的相应的抗体在应用上应该没有太大的困难，然而，蛋白的构象将影响抗体与其识别区域之间的相互作用。这种情况下可能存在的问题是如果在折叠的蛋白中，该识别区域被藏在蛋白的内部，抗体将无法接触到该区域。（无法产生相互作用）。 2、识别区域的选择原则一般说来最理想的抗原性识别区域应具备亲水、位于蛋白表面和结构上易变形性等特点。因为在大多数的天然（自然）环境中，亲水区域倾向于集中在蛋白表面，而疏水区域常常被包裹在蛋白内部，同样道理，抗体只能与在蛋白表面发现的识别区域相互作用，而当这些识别区域有足够的结构易变形性而转移到抗体可接触的位置时，将会与抗体间有很高的亲和性。 3、连续的与不连续的识别区域连续的区域是指由连续的氨基酸序列（残基）构成的识别区域。大多数抗体是针对连续识别区域的，抗体能与这类区域以很高的亲和力相结合表明这段序列不在蛋白内部。不连续的识别区域是代表有一定折叠的一段多肽序列，或是将两段分离开的多肽连在一起的抗体的识别区域。在某些情况下，针对这样不连续识别区域的抗体也能产生，只是用来免疫的抗原多肽必须具备与该不连续识别区域相似的二级结构，而序列的长度需要符合相关的要求。 4、基本建议为了避免识别区域隐藏在蛋白内部的风险，我们通常建议选择蛋白的N，C两端来产生的相应的抗体。因为在完整的蛋白中，N，C两端通常是暴露在蛋白表面的。然而，一定要注意膜蛋白的C端疏水性太强，不适合作为抗原。 5、序列的长度通常我们建议抗原多肽的序列长度在8-20个氨基酸残基之间，如果太短，就有多肽太特殊、所产生的抗体与天然蛋白之间的亲和力（结合能力）不够强的风险，同样，如果序列长度超过20，将有可能引入二级结构，所产生的抗体失去特异性的可能，而且肽链越长，通常合成难度增大，不易获得高纯度的产品。 6、载体蛋白交联的选择基本原则：将载体蛋白加在远离抗体识别区域的一端，在序列中没有Cys的情况下在N或C端加上Cys为交联的首选方法。 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 养一斋 |
» 猜你喜欢
欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律
已经有69人回复
-
有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验）
已经有11人回复
-
时间戳又变了8-15
已经有23人回复
-
filecode=后面第一个是大写字母
已经有7人回复
-
filecode
已经有12人回复
-
小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊
已经有13人回复
-
哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？
已经有7人回复
-
关于Filecode分析方法
已经有13人回复
-
各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。
已经有8人回复
-
咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否
已经有22人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
今天看到省基金挂了，希望国基面上能中吧
+5/430
-
西安交大马伟/王亚洲课题组诚聘联培博士和硕士学生多名-有机生物电子学方向
+1/185
-
上海同城
+1/124
-
北京信息科技大学机电工程学院硕士研究生招生线上宣讲会——8月16日
+1/81
-
东南大学杰青/海优团队招聘催化方向博士后
+1/81
-
中国科学院空天院精密干涉测量团队招聘光学/算法/机械方向博士后/特别研究助理
+1/80
-
中国科学院空天院精密干涉测量团队招聘光学/算法/机械方向博士后/特别研究助理
+1/80
-
广东医科大学博士后招聘-基础医学，生信等方向
+1/38
-
加拿大/英属哥伦比亚大学曹彦凯课题组招收全奖博士/博后 [机器人/控制方向]
+1/36
-
物理学报录用，散币感谢合作者和审稿人
+2/26
-
希望这篇论文能中
+2/12
-
西安交通大学杜宝吉课题组招收申请考核制博士生
+2/8
-
27推免-广州医科大学封红亮教授招收精神医学应用心理学推免生
+1/5
-
祈福今年中标教育部和省社科都中标，为退休倒计时画上圆满的句号
+1/5
-
论文万能框架
+1/4
-
中山大学国家级青年人才课题组招收推免硕士2名（2027年入学）
+2/4
-
海南大学化学院—功能分子器件团队2027博士招生+博士后招聘
+1/2
-
悉尼科技大学（QS 第87）数据科学/AI招收2027年秋季入学全奖及CSC博士生
+1/1
-
国家级人才团队诚聘生物信息相关专业的科研助理
+1/1
-
澳门大学先进智能高分子团队诚聘智能视窗/辐射制冷方向博士后
+1/1
简单回复
tzynew2楼
2023-02-10 06:46
回复
专注多肽(金币+1): 谢谢参与
哦 发自小木虫Android客户端
nono20093楼
2023-02-10 08:39
回复
专注多肽(金币+1): 谢谢参与
`
2023-02-10 12:40
回复
专注多肽(金币+1): 谢谢参与
XG-WUST5楼
2023-02-11 19:20
回复
专注多肽(金币+1): 谢谢参与
up 发自小木虫IOS客户端
2023-02-12 10:02
回复
专注多肽(金币+1): 谢谢参与
