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造模方法:功能性腹泻脾虚证动物模型
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【建模材料】 1、动物 健康雄性Wistar大鼠135只,清洁级,3周龄。 2、饲料 基础配方饲料成分为酪蛋白18%,淀粉58.8%,蔗糖10%,玉米油5%,纤维素3%,维生表3%,无机盐4%,蛋氨酸0.2%高乳糖饲料是将基础饲料中的淀粉全部改为乳糖。 3、试剂 淀粉酶检测试剂盒、乳酸、D-木糖检测试剂盒。 4、器材: 自制水环境小平台站立箱,箱体为112cmx62cmx41cm,箱内设置了15个小平台,平台直径8cm,高10cm,平台周边注水,水深1.5cm,水温维持在22+2度。木质矿场箱(100cmx100cmx40cm为立方形,内侧壁及底面为灰色,用黑线划分为25格,每格形制均为20cmx20cm,沿侧壁的格称为外周格(16个周边正方形),其余为中央格(9个中心正方形)。正中格正上方安詈摄像头,ACS-ZEAS型电子秤,游泳桶,高速冷冻离心机,酶标仪。【建模方法】 1、方法及造模 健康雄性Wistar大鼠120只,清洁级,3周龄,购进动物先进行3天活应性饲养。40W日光灯照射8:00-20:00,室内温度控制在22.0-24.0度,保持安静,单笼饲养。常规鼠类饲料喂养。随机分为7组,分别为空白对照组、游泳组、水环境小平台站立组(简称小平台站立组)、游泳加水环境小平台站立组、高乳糖饲料喂养组(简称高乳糖组、高乳糖饲料加游泳组(高乳糖加游泳组)、高乳糖饲料加水环境小平台站立组(高乳糖加小平台站立组)。空白对照组(n=15):基础配方饲料喂养。 游泳组(n=15):基础配方饲料喂养,每天进行游泳,以力竭为度。 小平台站立组(n=15):基础配方饲料喂养,每日8:00-次日8:00置入水环境小平台站立箱。 游泳加小平台站立组(n=15);基础配方饲料喂养,每日游泳,力竭为度,18:00-次日8:00詈入水环境小平台站立箱,高乳,精组(n=15):高乳糖饲料喷养。 高乳,糖加游泳组(n=15):高乳,糖饲料喂养,每日游泳,力竭为度。 高乳糖加小平台站立5h组(n=15);高乳糖饲料喂养,每日7:00-12:00詈入水环境小平台站立。高乳糖加小平台站立9h组(n=15):高乳糖饲料喂养,每日22:00-次日7:00置入水环境小平台站立高乳糖加小平台站立14h组(n=15);高乳糖饲料喂养,每日18;00-次日8;00詈入水环境小平台站立造模14天,第15天每组随机取10只取材,剩余大鼠每天基础配方饲料饲养,观察模型持续时间。 2、观察指标 每天对动物模型进行观察记录,从动物外观表征,粪便情况,结合体重,摄食量,饮水量等对大鼠进行观察,并进行腹泻指数记录方法如下:大鼠单个放在热有浦纸的鼠笼内,每隔1挣浦纸,记录大鼠排稀类点数,观容4h,脂泻指数=稀便率(每只动物所排稀便数与总便数之比)x稀便级(以稀便污染滤纸形成污迹面积的大小定级,分为4级:1级为污直径小于1cm,2级污染直径1-1.9cm,3级污染直径2-3cm,4级污染直径大干3cm)。统计时先逐个统计每一堆稀便的级数,然后将该鼠所有希便级数相加除以稀便次数,得到稀便的平均级数一-稀便级,级数直径的测量:粪便形状为圆形,则直接量直径:若粪便形状为椭圆形则测量最长和近似圆的直径,相加除以2。 3、旷场实验 第7天、第14天、第28天进行旷场实验。 4、取材及检测 第15、29天分批取材。腹主动脉取血,离心取血清,采用试刻盒进行血清乳酸、淀粉酶活性、尿D-木糖测定。 5、统计及分析 数据采用SPSS17 0软件进行统计学外理,各项指标中,计量变量采用均数+标准差描述,正态分布的资料采用单因表方差分析,两两比较进行卖角乙一安-t检验,偏杰分布的资料采用秩和检验进行组间比较,检验水准取a=005,P<005为有显著性差异,P<0.01为有极显著性差异,具有统计学意义, |
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