24小时热门版块排行榜    

查看: 1610  |  回复: 20
当前主题已经存档。

zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)

一般是在定容之前测,定好PH后再定容,但是在定容时的体积不应该和要配的体积差别太大,并且用浓度较高的酸,然后再定容,灭菌。毕竟它是一种缓冲液,后面的定容和灭菌的体积变化对它的PH影响不大。具体要用多少的PH要看你的蛋白的PH为多少时比较稳定吧!
11楼2009-09-17 13:51:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

re楼上
无需灭菌……
12楼2009-09-17 14:09:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
楼上:
灭菌时必须的吧!
13楼2009-09-17 14:18:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by zhuifeng7000 at 2009/9/17, 14:18:
楼上:
灭菌时必须的吧!

从来就没见做WB的试剂是需要灭菌的
就算灭了菌,在操作过程中又不是无菌的,那么有什么灭菌的意义和必要性呢?
14楼2009-09-17 14:28:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
有时灭菌并不是需要在无菌操作的时候才需要进行的。举个例子,就像配置一定浓度的氨苄 ,配置的原液的浓度肯定是不会有杂菌生长的,但是配置的时候为什么还要用灭菌的dd水,并且要滤器过滤呢?只是为了尽可能少的带入污染而已。
15楼2009-09-17 15:04:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by zhuifeng7000 at 2009/9/17, 15:04:
有时灭菌并不是需要在无菌操作的时候才需要进行的。举个例子,就像配置一定浓度的氨苄 ,配置的原液的浓度肯定是不会有杂菌生长的,但是配置的时候为什么还要用灭菌的dd水,并且要滤器过滤呢?只是为了尽可能少的 ...

配置Amp原液无需无菌水,只需配制后滤菌。
因为后续的操作是细菌,因此有必要防微杜渐。
而做WB,根本不需要无菌操作,因为根本对实验没有任何的影响。我相信世界上99.99% WB做砸了不是因为buffer染菌引起的。而应该考虑buffer的离子强度、pH、样品的制备等问题。至于里面残留的细菌含有的蛋白质是否能够对实验产生影响,我想,能够浓到产生影响的buffer估计早就不知道变质到哪里去了。而在发生这么严重的污染之前,早就用完了
16楼2009-09-17 16:32:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

寒山拾得

木虫 (小有名气)

先调PH再定容,定容完不影响pH。
17楼2009-09-17 16:37:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by zhuifeng7000 at 2009-9-17 15:04:
有时灭菌并不是需要在无菌操作的时候才需要进行的。举个例子,就像配置一定浓度的氨苄 ,配置的原液的浓度肯定是不会有杂菌生长的,但是配置的时候为什么还要用灭菌的dd水,并且要滤器过滤呢?只是为了尽可能少的 ...

如果不灭菌,直接放到4度冰箱保存的话,过一段时间你在灯下看溶液中可能会有一些悬浮的絮状物的,那是一些杂菌。也能不同的实验室的做法不一样吧,能得到正确的实验结果就好。
18楼2009-09-17 17:27:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
恩恩
不过我们放了之后没发现有絮状物……
有些是年初配的,到现在一直没问题~~~
不过我们用的是超纯水配的,可能有点关系
19楼2009-09-17 17:38:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小猫三两只

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
都是调好再定容,调时的体积跟最后的体积不要差别太大,相差10倍PH会影响一个单位

一般都是8吧,不过不同的实验可能要求也不同
20楼2009-09-17 21:32:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 350784478 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 306求0703调剂一志愿华中师范 +7 纸鱼ly 2026-03-21 8/400 2026-03-23 23:31 by chixmc
[考研] 384求调剂 +3 子系博 2026-03-22 6/300 2026-03-23 21:45 by 子系博
[考研] 一志愿中国石油大学(华东) 本科齐鲁工业大学 +4 石能伟 2026-03-17 4/200 2026-03-23 17:51 by 17862566385
[考研] 333求调剂 +6 87639 2026-03-21 10/500 2026-03-23 10:41 by Iveryant
[考研] 材料学硕333求调剂 +3 北道巷 2026-03-18 3/150 2026-03-21 18:17 by 学员8dgXkO
[考研] 求助 +5 梦里的无言 2026-03-21 6/300 2026-03-21 17:51 by 学员8dgXkO
[考研] 297求调剂 +11 戏精丹丹丹 2026-03-17 12/600 2026-03-21 17:47 by ColorlessPI
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +6 Mqqqqqq 2026-03-19 6/300 2026-03-21 08:04 by JourneyLucky
[考研] 083200学硕321分一志愿暨南大学求调剂 +3 innocenceF 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:35 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武理材料305分求调剂 +6 想上岸的鲤鱼 2026-03-18 7/350 2026-03-21 01:03 by JourneyLucky
[考研] 南京大学化学376求调剂 +3 hisfailed 2026-03-19 6/300 2026-03-20 23:43 by hisfailed
[考研] 295求调剂 +4 一志愿京区211 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:41 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西南交通 专硕 材料355 本科双非 求调剂 +5 西南交通专材355 2026-03-19 5/250 2026-03-20 21:10 by JourneyLucky
[论文投稿] 申请回稿延期一个月,编辑同意了。但系统上的时间没变,给编辑又写邮件了,没回复 10+3 wangf9518 2026-03-17 4/200 2026-03-19 23:55 by babero
[考研] 生物学调剂招人!!! +3 山海天岚 2026-03-17 4/200 2026-03-19 21:34 by 怎么释怀
[考研] 288求调剂,一志愿华南理工大学071005 +5 ioodiiij 2026-03-17 5/250 2026-03-19 18:22 by zcl123
[考研] 0703化学调剂 +5 pupcoco 2026-03-17 8/400 2026-03-19 13:58 by houyaoxu
[考研] 一志愿福大288有机化学,求调剂 +3 小木虫200408204 2026-03-18 3/150 2026-03-19 13:31 by houyaoxu
[考研] 材料工程专硕调剂 +5 204818@lcx 2026-03-17 6/300 2026-03-18 22:55 by 204818@lcx
信息提示
请填处理意见