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木虫 (正式写手)

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[交流] 如何定Tris-HCl的PH值

最近要做Western-Blot，需要配Tris-HCl溶液，我想问一下，它的PH值是定容之前测还是定容之后测？还有，其PH值一般是多少啊？

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朝为田舍郎，暮登天子堂。将相本无种，男儿当自强。

1楼2009-09-16 17:23:01

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三磷酸腺苷

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引用回帖:

Originally posted by zhuifeng7000 at 2009/9/17, 15:04:
有时灭菌并不是需要在无菌操作的时候才需要进行的。举个例子，就像配置一定浓度的氨苄，配置的原液的浓度肯定是不会有杂菌生长的，但是配置的时候为什么还要用灭菌的dd水，并且要滤器过滤呢？只是为了尽可能少的 ...

配置Amp原液无需无菌水，只需配制后滤菌。
因为后续的操作是细菌，因此有必要防微杜渐。
而做WB，根本不需要无菌操作，因为根本对实验没有任何的影响。我相信世界上99.99% WB做砸了不是因为buffer染菌引起的。而应该考虑buffer的离子强度、pH、样品的制备等问题。至于里面残留的细菌含有的蛋白质是否能够对实验产生影响，我想，能够浓到产生影响的buffer估计早就不知道变质到哪里去了。而在发生这么严重的污染之前，早就用完了