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木虫 (正式写手)

[交流] 如何定Tris-HCl的PH值

最近要做Western-Blot,需要配Tris-HCl溶液,我想问一下,它的PH值是定容之前测还是定容之后测?还有,其PH值一般是多少啊?
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朝为田舍郎,暮登天子堂。将相本无种,男儿当自强。
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


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引用回帖:
Originally posted by zhuifeng7000 at 2009/9/17, 15:04:
有时灭菌并不是需要在无菌操作的时候才需要进行的。举个例子,就像配置一定浓度的氨苄 ,配置的原液的浓度肯定是不会有杂菌生长的,但是配置的时候为什么还要用灭菌的dd水,并且要滤器过滤呢?只是为了尽可能少的 ...

配置Amp原液无需无菌水,只需配制后滤菌。
因为后续的操作是细菌,因此有必要防微杜渐。
而做WB,根本不需要无菌操作,因为根本对实验没有任何的影响。我相信世界上99.99% WB做砸了不是因为buffer染菌引起的。而应该考虑buffer的离子强度、pH、样品的制备等问题。至于里面残留的细菌含有的蛋白质是否能够对实验产生影响,我想,能够浓到产生影响的buffer估计早就不知道变质到哪里去了。而在发生这么严重的污染之前,早就用完了
16楼2009-09-17 16:32:14
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xuezhen

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
可以自己调自己所需的PH,我们实验室一般在配之前调,体积溶到差不多再调,也不知大家怎样调的。
2楼2009-09-16 17:29:45
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wangyh2028

铁虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
先调好pH值再定容道所需的体积
3楼2009-09-16 17:49:58
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anik

银虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
一些公司发的宣传手册上都有配治方法的,比如TAKARA的
4楼2009-09-16 18:21:39
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