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菊花茶

木虫 (著名写手)

[交流] 克隆培养基的配置

蓝白斑筛选用到的培养基含有amp、iptg、x-gal,一般是把三样试剂加入培养基混匀然后倒平板,有没有人先倒了平板然后在涂菌液的时候把iptg和x-gal涂到培养基表面进行筛选的啊?如果有效果怎样?谢谢给出建议
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天若孤独

银虫 (职业作家)

★ ★ ★ ★ ★
350784478(金币+2,VIP+0):感谢参与 9-16 17:39
菊花茶(金币+3,VIP+0):能说下涂的量吗? 9-16 18:45
我一直都是先倒平板再涂iptg和x-gal,效果还可以,涂匀晾干即可。
有人也先往摇好的菌里加了iptg和x-gal再涂平板
在风中静静等待,在梦中默默哭泣,在心中点燃希望。
3楼2009-09-16 16:41:01
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695

木虫 (职业作家)


菊花茶(金币+1,VIP+0): 9-16 15:45
这样效果不是很好的,不均匀,量有限吧
2楼2009-09-16 15:23:10
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馋猫

银虫 (小有名气)


菊花茶(金币+1,VIP+0):这样做了,长出的斑太多,有很多都检测不出来,可能假阳性多,就是为了目的性更强一点儿 9-16 18:47
涂在表面,如果不是做文库,一般的克隆直接忙挑就行了,不需要蓝白斑
4楼2009-09-16 17:30:14
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anik

银虫 (正式写手)


菊花茶(金币+1,VIP+0):x-gal是要见光分解,不过还没搞懂你说的先后,呵呵 9-16 18:50
在涂板之前涂布IPTG和X-GAL,效果不错。原因是:X-GAL见光分解,所以。。。
5楼2009-09-16 18:23:02
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