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xiangao

金虫 (正式写手)

[交流] 分泌表达

请问大家:有没有做过分泌蛋白的课题,现在做的一个分泌蛋白就是分泌不到胞外(革兰氏阴性),是信号肽的问题吗?
帮忙给点建议
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蓝皮鼠7983

至尊木虫 (文坛精英)

飞过蓝天

呵呵,没做过,只上过理论课
海到尽头天做岸,山登绝顶我为峰。
2楼2009-09-16 11:31:31
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liujunhero

新虫 (文学泰斗)

文献杰出贡献文献杰出贡献

可以加一些诱导剂,促进分泌
3楼2009-09-16 12:11:24
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

一般革兰氏阴性是分泌到周质空间,胞外比较困难!
4楼2009-09-16 12:42:03
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银杏下

金虫 (小有名气)


xiangao(金币+1,VIP+0): 9-16 16:07
含有分泌信号的蛋白很难分泌到胞外,而是在周质空间中,用适当的盐溶液(可以上网找具体的溶液)可以把周质的蛋白释放就可以检测到蛋白,或者直接看pET22b(+)的manual,上面应该有。
5楼2009-09-16 12:48:23
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jqq1985

银虫 (正式写手)

一般都是分泌到周质空间,,可以用休克法来提取里面的蛋白.要是想到真正胞外培养基中,还是用G阳性菌,芽孢杆菌一类的.
6楼2009-09-16 14:23:28
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wordsworth3180

木虫 (正式写手)

有没有介绍蛋白分泌表达的综述性文章呀?
7楼2009-09-16 14:39:49
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xiangao

金虫 (正式写手)

现在检测胞内有蛋白分泌,周质空间没有,怎么能让它表达到周质空间呢?
8楼2009-09-16 16:09:45
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anik

银虫 (正式写手)

包涵体同样可以做的,分离出来然后变性即可
9楼2009-09-16 18:24:37
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qingqingcao288

木虫 (小有名气)

你用的什么信号肽
10楼2009-09-16 20:47:33
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