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Jackwangwang新虫 (小有名气)
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过表达质粒转染问题！！
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请教一个问题，最近在做过表达，egfp质粒构建好了，但是往细胞转染的过程中出现了问题，用了lipo2000，3000都没能转进去，按照说明书操作，细胞一直不添加双抗培养，传至6孔板中，待汇合度至80%左右，进行转染，质粒和脂质体都是用opti稀释轻轻吹打混匀，静置5min，然后1:1混合，轻轻吹打混匀，静置20min，添加至六孔板中(提前用pbs清洗六孔板），培养箱培养4-6h，然后换成完全培养基12-24h观察，没有荧光。想问问有没有做过h9c2转染的，请教一下到底哪里出了问题？ @biostar2009 @飞约疯人院 @wizardfan @youlinglyw 发自小木虫Android客户端 |
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