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Jackwangwang新虫 (小有名气)
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过表达质粒转染问题!!
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请教一个问题,最近在做过表达,egfp质粒构建好了,但是往细胞转染的过程中出现了问题,用了lipo2000,3000都没能转进去,按照说明书操作,细胞一直不添加双抗培养,传至6孔板中,待汇合度至80%左右,进行转染,质粒和脂质体都是用opti稀释轻轻吹打混匀,静置5min,然后1:1混合,轻轻吹打混匀,静置20min,添加至六孔板中(提前用pbs清洗六孔板),培养箱培养4-6h,然后换成完全培养基12-24h观察,没有荧光。想问问有没有做过h9c2转染的,请教一下到底哪里出了问题? @biostar2009 @飞约疯人院 @wizardfan @youlinglyw 发自小木虫Android客户端 |
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