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Jackwangwang

新虫 (小有名气)

[求助] 过表达质粒转染问题!!

请教一个问题,最近在做过表达,egfp质粒构建好了,但是往细胞转染的过程中出现了问题,用了lipo2000,3000都没能转进去,按照说明书操作,细胞一直不添加双抗培养,传至6孔板中,待汇合度至80%左右,进行转染,质粒和脂质体都是用opti稀释轻轻吹打混匀,静置5min,然后1:1混合,轻轻吹打混匀,静置20min,添加至六孔板中(提前用pbs清洗六孔板),培养箱培养4-6h,然后换成完全培养基12-24h观察,没有荧光。想问问有没有做过h9c2转染的,请教一下到底哪里出了问题?

@biostar2009 @飞约疯人院 @wizardfan @youlinglyw 发自小木虫Android客户端
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佳佳08

新虫 (小有名气)

支原体清一下,同时做一些容易转染细胞比如hela 293t作为对照

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在最没有能力的时候,遇到最想照顾一辈子的人
2楼2022-11-19 10:42:47
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