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chen33895铜虫 (小有名气)
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[求助]
体外抑制蔗糖酶活性实验，求大神解答
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根据文献等比例缩小体积，全部的反应均在96孔板上反应，先加入10μL底物（2%蔗糖溶液），后加入各浓度梯度的样品溶液20μL，反应5min后，加入蔗糖酶溶液10μL，反应20min后，加入无水乙醇20μL灭酶，灭酶后加入20μLDNS，最后用pbs稀释测定吸光度。几乎变大样品的加入量和缩小酶的活力都没用！ （1）蔗糖酶用的是来自酵母菌的，我看文献用的都是鼠小肠里的，且几乎所有人都是用葡萄糖试剂盒来测定葡萄糖吸光度值的 （2）蔗糖酶一开始用的20U/mL，DNS测定后吸光度太大，且各个样品几乎没有抑制率，今天换2U/mL，样品和阿卡波糖均几乎没有抑制率。 （3）求大神解答，哪里出了问题。 |
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