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那句话还是

新虫 (初入文坛)

[求助] IPTG诱导表达不出来 已有1人参与

想问问蛋白表达不出来的问题,我有三个蛋白要表达,一个17kD,两个10kD左右,12%、15%的分离胶都试过了,破碎细胞也试过了,IPTG加0.5mM,诱导6小时,但是目的蛋白附近的条带都比较模糊,但是marker又清晰,也不知道有没有表达出来,点样是10微升,对照点5微升,载体是PET28a ,感受态用的是Rosetta求大佬分析下@gyesang
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那句话还是

新虫 (初入文坛)

这是最近一次的跑胶图,左边比较浅的都是对照组

发自小木虫Android客户端
2楼2022-10-29 13:20:56
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那句话还是

新虫 (初入文坛)

3楼2022-10-29 13:27:28
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1797303268

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
那句话还是: 金币+1 2022-10-30 21:14:58
没看到图片,看到你描述。小蛋白会有这个问题的,跑胶会有一点点弥散。
4楼2022-10-30 11:07:20
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那句话还是

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 1797303268 at 2022-10-30 11:07:20
没看到图片,看到你描述。小蛋白会有这个问题的,跑胶会有一点点弥散。

好的谢谢,图片上传不了,但我感觉目的蛋白没有诱导出来,不知是不是这个载体不好使

发自小木虫Android客户端
5楼2022-10-30 21:23:52
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Davie d

新虫 (著名写手)

6楼2022-11-02 00:55:18
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那句话还是

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by Davie d at 2022-11-02 00:55:18
胶浓度调了吗

12% ,15%的分离胶都试过,现在准备换载体了,感觉PET28a不太好使

发自小木虫Android客户端
7楼2022-11-02 13:09:21
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1797303268

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 那句话还是 at 2022-10-30 21:23:52
好的谢谢,图片上传不了,但我感觉目的蛋白没有诱导出来,不知是不是这个载体不好使
...

表达蛋白价格助溶标签试试吧
8楼2022-11-03 19:49:27
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