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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » IPTG诱导表达不出来
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那句话还是

新虫 (初入文坛)

[求助] IPTG诱导表达不出来 已有1人参与

想问问蛋白表达不出来的问题，我有三个蛋白要表达，一个17kD,两个10kD左右，12%、15%的分离胶都试过了，破碎细胞也试过了，IPTG加0.5mM，诱导6小时，但是目的蛋白附近的条带都比较模糊，但是marker又清晰，也不知道有没有表达出来，点样是10微升，对照点5微升，载体是PET28a ，感受态用的是Rosetta求大佬分析下@gyesang
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1楼 2022-10-29 13:19:43
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那句话还是

新虫 (初入文坛)
这是最近一次的跑胶图，左边比较浅的都是对照组

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2楼2022-10-29 13:20:56
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那句话还是

新虫 (初入文坛)
为啥上传不了图片

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3楼2022-10-29 13:27:28
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1797303268

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
那句话还是: 金币+1 2022-10-30 21:14:58
没看到图片，看到你描述。小蛋白会有这个问题的，跑胶会有一点点弥散。
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4楼2022-10-30 11:07:20
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那句话还是

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 1797303268 at 2022-10-30 11:07:20
没看到图片，看到你描述。小蛋白会有这个问题的，跑胶会有一点点弥散。

好的谢谢，图片上传不了，但我感觉目的蛋白没有诱导出来，不知是不是这个载体不好使

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5楼2022-10-30 21:23:52
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Davie d

新虫 (著名写手)
胶浓度调了吗

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6楼2022-11-02 00:55:18
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那句话还是

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by Davie d at 2022-11-02 00:55:18
胶浓度调了吗

12% ，15%的分离胶都试过，现在准备换载体了，感觉PET28a不太好使

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7楼2022-11-02 13:09:21
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1797303268

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 那句话还是 at 2022-10-30 21:23:52
好的谢谢，图片上传不了，但我感觉目的蛋白没有诱导出来，不知是不是这个载体不好使
...

表达蛋白价格助溶标签试试吧
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8楼2022-11-03 19:49:27
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