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huay13

铜虫 (初入文坛)

[交流] LAMP扩增 已有1人参与

Bst 聚合酶全长是有5-3的外切酶活性,假如使用Bst 聚合酶全长进行扩增,外引物扩增的时候不会把内引物降解吗?请教各位老师。
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食品是个坑
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

★
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如果用全长,应该会。这也是Taq酶切除荧光探针的原理

LAMP用的应是Bst Large fragment(N端外切酶活性已经没有了)
行至水穷处,坐看云起时
2楼2022-10-22 10:16:41
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huay13

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by pennchem at 2022-10-22 10:16:41
如果用全长,应该会。这也是Taq酶切除荧光探针的原理

LAMP用的应是Bst Large fragment(N端外切酶活性已经没有了)

现在是有用全长进行扩增的。巨匠生物有产品,neb也有类似的
Bst DNA Polymerase Full Length 是 Bacillus stearothermophilus DNA 聚合酶的全长,具有 5’→3’ DNA 聚合
酶活性和 5’→3’核酸外切酶活性,以及很强的链置换(strand displacement)活性。Bst DNA Polymerase Full

Length 可用于等温扩增反应,如 LAMP (Loop-mediated isothermal amplification),RCA (Rolling-circle

amplification)等。
食品是个坑
3楼2022-11-03 11:42:14
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