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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » RNA问题
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小猫三两只

金虫 (正式写手)

[交流] RNA问题

今天突然想到一个问题,我们平时提的RNA常说是总RNA,但检测时看到的又说是mRNA,以mRNA的质量来判断提取的总RNA的质量.
1  这个是不是因为mRNA占总RNA的比例比较大,才这样断定的.为什么不说提mRNA呢
2  下一步反转录时是以mRNA为模板,那么tRNA和rRNA在这个过程中是以何种形式并如何存在呢,对反应会有什么影响呢
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1楼 2009-09-14 22:29:59
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112976553

金虫 (小有名气)
★
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tRNA反转录不了吧，rRNA可能会和mRNA并存。
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2楼2009-09-15 08:54:19
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linxi8579

铜虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
提RNA电泳检测的是三条带即28S，18S，5.8S的吧，对于真核的话。应该是rRNA，这是含量最多的，如果28和18S的明显就说明RNA没有降解。我们的目的是mRNA,反转录或者PCR通过特异性将目的片段再选择出来。我想应该是这样。
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3楼2009-09-15 09:20:02
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michaelwuqingyu

金虫 (正式写手)
跑胶看到的是rRNA，占的比例很大， mRNA只占3% 左右，纯化mRNA还需要其他的工序。
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4楼2009-09-15 09:42:46
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jianhuafly

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
嗯，分子生物学基础理论还是要看看的。提取的总RNA中mRNA只占一点点，常见的分子生物学后续试验不需要再纯化mRNA了，直接逆转录就好。
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5楼2009-09-15 09:50:53
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HDLWH

木虫 (正式写手)
★
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mRNA有多聚A尾巴，所以可以被转录
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6楼2009-09-15 10:11:36
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