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[交流] Bafilomycin A1(巴佛洛霉素A1)抑制实验分享

Bafilomycin A1体外实验分享
在低浓度(1nm)时,能有效且特异地抑制和杀死pediatric B-cell急性淋巴细胞白血病细胞。针对自噬途径的早期和晚期、线粒体为靶点,并诱导caspase非依赖性凋亡。Bafilomycin A1诱导Beclin 1与Bcl-2结合,进一步抑制自噬并促进凋亡细胞死亡[1]
Bafilomycin A1细胞实验实验分享
使用0.05%胰蛋白酶收集细胞并悬浮在含有10%FCS的培养基中,并将200μL悬浮液添加到96孔板的每个孔中。细胞培养20小时以粘附。将Bafilomycin A1(巴佛洛霉素 A1) 添加到孔中,终浓度为 200、400 和 800 nM,一式三份。 在 24、48 和 72 小时,将 20 μl WST-1 添加到细胞中。 然后在 37°C 下孵育 4 小时,使用 675 nm 参比使用分光光度计读取板,以确定 435 nm 处的光密度 (OD)。[2]

[1]Autophagy. 2015;11(8):1437-1438.
[2]Exp Ther Med. 2015 Nov;10(5):1829-1834.
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