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免疫组化测定
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免疫组化 用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学(immunohistochemistry)技术或免疫细胞化学(immunocytochemistry)技术。 原理 免疫组化是根据抗原抗体反应和化学显色原理。组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合,再利用一抗与标记生物素标记的二抗进行反应,后者再用标记辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AKP)等的抗生物素(如链霉亲和素等)结合,最后通过呈色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分,在光学显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物,从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。 酶标记的抗体与组织或细胞作用后,加入酶的底物,生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,通过光镜或电镜,对细胞表面和细胞内的各种抗原成分进行定位研究。 免疫酶标技术是目前最常用的技术,与免疫荧光技术相比酶标记法主要优点是定位准确,对比度好,染色标本可长期保存,适合于光、电镜研究等。 |
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