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ouyang1999新虫 (初入文坛)
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跪求甲烷氧化菌筛选分离方法 已有1人参与
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| 最近在做甲烷氧化菌筛选分离,采用NMS培养基富集,在富集液中扩增出了甲烷代谢的基因pmoA,但把富集菌液稀释涂布到平板(除了加琼脂,其他组分与液体培养基一样)上,放在真空干燥器里,充入甲烷倒置培养,第二天就长出来很多菌,挑单菌落做不充甲烷,放空气里的对照,发现它们也长出来了,但NMS培养基里没有碳源,不知道它们是靠什么碳源长出来的,之后又挑这些菌划线在LB板上,有些在LB板上长,有些却没有长出来,16S测序发现这些菌是甲基型,但不能利用甲烷,感觉这个NMS培养基的选择性好差啊,我看文献里,好像都是7-14天才长出单菌落,是我等待时间太短吗?我之前不知道这个培养基的选择性这么差,调的都是3-4天长出来的单菌落。所以跪求同做甲烷氧化菌筛选的友友们一起探讨! |
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