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ouyang1999新虫 (初入文坛)
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[交流]
跪求好氧甲烷氧化菌筛选分离方法
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| 最近在做甲烷氧化菌筛选分离，采用NMS培养基富集，在富集液中扩增出了甲烷代谢的基因pmoA，但把富集菌液稀释涂布到平板（除了加琼脂，其他组分与液体培养基一样）上，放在真空干燥器里，充入甲烷倒置培养，第二天就长出来很多菌，挑单菌落做不充甲烷，放空气里的对照，发现它们也长出来了，但NMS培养基里没有碳源，不知道它们是靠什么碳源长出来的，之后又挑这些菌划线在LB板上，有些在LB板上长，有些却没有长出来，16S测序发现这些菌是甲基型，但不能利用甲烷，感觉这个NMS培养基的选择性好差啊，我看文献里，好像都是7-14天才长出单菌落，是我等待时间太短吗？我之前不知道这个培养基的选择性这么差，调的都是3-4天长出来的单菌落。所以跪求同做甲烷氧化菌筛选的友友们一起探讨！ |
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