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糖尿病并发动脉粥样硬化动物模型
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糖尿病并发动脉粥样硬化动物模型 【造模机制】采用高脂高糖饲料喂养加小剂量链脲佐菌素(STZ)可造成大鼠2型糖尿病高血糖能够刺激蛋白激酶C的活化,使内皮细胞屏障功能受损,通过多条途径使自由产生增多对血管和内皮产生毒性作用形成动脉粥样硬化病变。 【造模方法】选用1个月龄体重140~160g,SD大鼠，高脂高糖饲料由基础饲料加人脂肪15%、蔗糖20%、鸡蛋5%、胆固1%、食盐0.5%配制而成。STZ和枸橼酸临用时配成0.Immol/L,pH4.2的枸橼酸枸橼酸钠缓冲液,于 4℃下保存。造模方法:大鼠每笼只均适应性喂养3天后称重,随机取8只作为空白对照组,饲以基础饲料,其余为糖尿病(DM)实验组,喂高脂高糖饲料,均自由进食、饮水共4周，诱导胰岛素抵抗。再将各组大隔夜空腹12小时后，右侧腹腔注射其中实验组大鼠注射2%TZ30mg/kg(未成模者在注射后11)并此间继续喂以高糖高脂饲料。空白组注射相同剂量的枸橼酸钠缓冲液并喂以普通饲料。DM 判定标准为:注射后第3714日测定血糖,如随机血糖超过16.9mmol/L;或出现多饮、多尿、消瘦、乏力、懒动等DM症状且2次随机血糖高于11.1mmol/L即为造模成功。 取材和检测:第6周末，大鼠禁食10小时，1%巴比妥钠45mg/kg麻醉下由眼眶静脉丛采血测血糖、血脂。第11周末处死动物并取主动脉弓部一部分于甲醛溶液中固定，另一部分置于2.5%戊二醛液中保存。血糖采用强生稳步血糖仪测定;血脂采用直接一步法或氧化酶法测TC、TGHDLL、LDL-L。光镜、电镜标本制备及光镜病理组织学和扫描电镜血管内膜面超微结构观察并拍照 【模型特点】先饲以高脂高糖饲料4周，促发胰岛素抵抗，继以小剂量STZ(30mg/kg)腹腔注射，可以成功诱导建立糖尿病并发动脉粥样硬化动物模型。注射STZ2周后大鼠血糖、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白及HDL-L/总胆固醇均显著高于空白组;形态学观察发现，模型组动脉出现典型动脉粥样硬化(AS)病变。 【应用范围】本模型适用于糖尿病并发动脉粥样硬化症的发病机制和防治研究。特别是应用于糖尿病时大血管病变的研究。 【注意事项】 1.注意改善造模动物的饮食需要 高糖高脂饮食会在进食2周后因油腻影响胃口，体重增加减慢，可以在进食量少的白天给予5g/只的普通饲料，同时尽量保持饲料干燥和香味,也可用果糖代替食物中的白糖进食量会增加。 2.STZ应现配现用 最好分批次配用，同时用冰袋装好保存以保持其有效性。因大鼠个体差异,第1次注射STZ后血糖未升高者可再注射，成模率会增高。 【模型评估】本模型通过较长期的“糖毒性”“脂毒性”所建的糖尿病伴动脉粥样硬化病变大鼠模型与人类2型糖尿病代谢特征相似，DM与AS发病特点也相似，省时、成功率高(95%)。是目前研究DM的AS较理想的动物模型，也是研究人类糖尿病大血管病变较理想的动物模型。 |
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