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岸上手牵手

新虫 (小有名气)

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虫号: 21749909
注册: 2020-04-07
专业: 基础兽医学

[交流] 抗菌物质分离鉴定

求各位大神指教，本人小白最近在做菌体发酵，想鉴定出发酵上清液中的抗菌物质具体是什么。目前采用了硫酸铵沉淀，沉淀后进行了透析，现在停在了透析，后续想通过层析和SDS-PAGE电泳来进行试验。但目前层析遇到实验室没有人做过层析，查文献大多用sephadex G-75与EDTA sephadex G-75两种层析。全基因组测序后通过BAGEL4与antiSMASH进行了抗菌物质预测。BAGEL4得到两种细菌素分子是11Kd与10KD，等电点都在9左右。现遇到以下问题：求各位大神指教
1、现在后续实验打算使用sephadex G-75、EDTA sephadex A-25填料，sephadex G-75是根据BAGEL4预测选的、EDTA sephadex A-25是看文献的（自己一直没看懂该怎么选）。这样两种层析填料的选择合理吗？
2、如果填料合理或重新选择后后续实验使用时可以购买sephadex G-75、EDTA sephadex A-25填料、中低压1.6cm×30cm玻璃层析柱、蠕动泵（借的）、没有核算蛋白检测仪与自动收集器（资金有限）。这个层析实验能继续吗？
3、 sephadex G-75与EDTA sephadex G-75两种层析看文献前后顺序两种都有，那种顺序更合理？
4、 sephadex G-75与EDTA sephadex G-75两种层析柱区别只是填料不同吗？其他柱子装置什么的可以共用吗？

发自小木虫Android客户端

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