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Monday.

新虫 (初入文坛)

[求助] 萌新求大佬解答困惑!!经amp筛选出来的单菌落送检测序无信号!!!!这是为什么! 已有1人参与

您好!我是科研萌新,最近做实验遇到的问题就是通过氨苄抗性板子筛选的菌落经过挑菌,摇菌,送检后发现无信号。感受态是DH5α,质粒上有amp+的抗性基因,请问这是什么原因呀,我目前所知可能是传代次数太多导致质粒丢失,或者杂菌污染,会不会是因为amp+培养基的浓度过低,导致筛选效率低下?请您指点。明明在氨苄的板子上已经长出单菌落了,挑出来摇菌也明显浑浊了,为什么送检没有信号呢!?
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天使之城78

铁虫 (初入文坛)

抗生素可能失效了,建议涂个DH5α对照
2楼2022-09-01 21:44:55
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乌克兰跑男

铜虫 (正式写手)

氨苄就是容易出岔子  不过也有可能你的dna提的不纯

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我思故我在
3楼2022-09-02 09:03:06
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534720018

至尊木虫 (著名写手)

把你的实验过程具体描述一下,不然很难猜的

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4楼2022-09-02 09:34:13
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超转运rna

新虫 (初入文坛)

amp抗生素特别容易出现卫星群落,这跟氨苄本身的作用机理有关系,有可能是挑到了周围的杂菌,当然其他过程也有可能,可以详细说说实验过程

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5楼2022-09-06 20:33:39
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EnochZheng

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

摇完菌之后有没有PCR扩增测试顺插反插呢?
6楼2022-09-11 17:59:35
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