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Senni94

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助! 做了克隆过后测序和目的基因比对不上

求助!做了分子克隆,测序过后和目的基因比对不上怎么办啊? 获取目的片段的时候,是看着大小差不多的切的胶,连上了完全比对不上,物种都不对了。这种事什么情况啊?应该怎么办啊。
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Italyhope

金虫 (正式写手)

重新挑平板上其他菌,多挑几个,做菌落PCR,能PCR出来且条带正确的,选几个扩大提质粒,酶切验证一下。以上都对了再送一两个去测序。如果菌落PCR都出不了正确条带,只能从头克隆和连接。

发自小木虫Android客户端
2楼2022-08-30 21:54:32
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Senni94

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Italyhope at 2022-08-30 21:54:32
重新挑平板上其他菌,多挑几个,做菌落PCR,能PCR出来且条带正确的,选几个扩大提质粒,酶切验证一下。以上都对了再送一两个去测序。如果菌落PCR都出不了正确条带,只能从头克隆和连接。
...

我就是挑了好几个菌去做了菌落PCR 做了三次重复 测序结果都是一样的 它比对出来 都是另一个物种了
3楼2022-08-31 15:10:47
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