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【悬赏金币】回答本帖问题，作者tevejdey将赠送您 50 个金币

tevejdey

新虫 (小有名气)

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[求助] 请问96深孔板培养大肠杆菌表达蛋白和大体积的一样吗已有1人参与

请问培养体系应该多大？培养时间一样吗？如果进行诱导的话是培养多久会到指数生长期呢？具体操作可以说一下吗

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烦躁已经有5人回复

1楼 2022-08-03 14:44:44

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ap372767129

铁虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

不一样的。96孔板的小体系我没做过。正常都是250 mL三角瓶装50 mL培养基来发酵。同样比例放大到5 L三角瓶，表达量会降低。拿pET-28a表达载体来说，活化的菌液接入TB培养基后，先在37度下摇3 h，然后加入终浓度0.5 mM的IPTG，转入18-25度下继续发酵4-24 h。

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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

tevejdey

2楼2022-08-03 16:57:05

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sanlang_qq

铜虫 (著名写手)

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专业: 临床兽医学

完全不一样的，小体积大概率诱导不出来的

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然后呢

3楼2022-08-03 20:18:43

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tevejdey

新虫 (小有名气)

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引用回帖:

3楼: Originally posted by sanlang_qq at 2022-08-03 20:18:43
完全不一样的，小体积大概率诱导不出来的

请问是为什么啊？那高通量筛选表达效果是通过什么方法啊

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4楼2022-08-03 21:16:10

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tevejdey

新虫 (小有名气)

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专业: 环境微生物学

送红花一朵

引用回帖:

2楼: Originally posted by ap372767129 at 2022-08-03 16:57:05
不一样的。96孔板的小体系我没做过。正常都是250 mL三角瓶装50 mL培养基来发酵。同样比例放大到5 L三角瓶，表达量会降低。拿pET-28a表达载体来说，活化的菌液接入TB培养基后，先在37度下摇3 h，然后加入终浓度0.5 m ...

好的谢谢

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5楼2022-08-03 21:17:54

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