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tevejdey

新虫 (小有名气)

[求助] 请问96深孔板培养大肠杆菌表达蛋白和大体积的一样吗已有1人参与

请问培养体系应该多大?培养时间一样吗?如果进行诱导的话是培养多久会到指数生长期呢?具体操作可以说一下吗
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ap372767129

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不一样的。96孔板的小体系我没做过。正常都是250 mL三角瓶装50 mL培养基来发酵。同样比例放大到5 L三角瓶,表达量会降低。拿pET-28a表达载体来说,活化的菌液接入TB培养基后,先在37度下摇3 h,然后加入终浓度0.5 mM的IPTG,转入18-25度下继续发酵4-24 h。

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2楼2022-08-03 16:57:05
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sanlang_qq

铜虫 (著名写手)

完全不一样的,小体积大概率诱导不出来的

发自小木虫IOS客户端
然后呢
3楼2022-08-03 20:18:43
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tevejdey

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by sanlang_qq at 2022-08-03 20:18:43
完全不一样的,小体积大概率诱导不出来的

请问是为什么啊?那高通量筛选表达效果是通过什么方法啊

发自小木虫Android客户端
4楼2022-08-03 21:16:10
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tevejdey

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by ap372767129 at 2022-08-03 16:57:05
不一样的。96孔板的小体系我没做过。正常都是250 mL三角瓶装50 mL培养基来发酵。同样比例放大到5 L三角瓶,表达量会降低。拿pET-28a表达载体来说,活化的菌液接入TB培养基后,先在37度下摇3 h,然后加入终浓度0.5 m ...

好的谢谢

发自小木虫Android客户端
5楼2022-08-03 21:17:54
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