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efdc

铁虫 (小有名气)

[交流] 求助:关于荧光标记引物的问题

我想作转座子显示,它是一种基于AFLP的技术。里边要用到荧光标记或放射性标记的引物。我看的几篇文献和我做的物种、类型类似,所以打算采用上边的引物、接头和实验方法。但是里边选择性扩增中一条引物采用了IRD-700标记,最后在LiCor-4300测序仪上进行分析。因为我询问了下外边的公司,没有用过IRD-700标记,他们的测序仪是ABI 377,他们不清楚IRD-700标记的在这个测序仪上是否可用。而且IRD-700标记国内做不了,得拿到国外,2 OD/1000元,而普通的标记则便宜很多,例如FAM标记上海生工就可以,2OD/300元。所以我想问下,在这个实验里是否可以将IRD-700替换为其它荧光标记,例如FAM标记?如果无法替换,在ABI377上是否可以分析IRD-700标记的产物?

还有哦,是不是可以不叫荧光标记,然后就跑普通的PAGE胶?它们的区别是不是就是灵敏性的差别,就如同普通PCR和real time PCR?

加了荧光标记的引物,PCR产物是不是也可以跑普通的PAGE或者琼脂糖胶(就是自己先检验下PCR好坏,然后再拿到公司的测序仪上跑)?

敬请各位指教。

[ Last edited by efdc on 2009-9-11 at 12:49 ]
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