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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » His标签蛋白纯化后透析
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xxx000

新虫 (初入文坛)

[求助] His标签蛋白纯化后透析

各位大牛，您好！

      请问纯化后蛋白（bf：50 mm tris, 150 mm nacl, 100 mm 咪唑，ph8.0），用下列3种储存液透析，哪种效果会好些：

     1、50 mm tris, 200 mm kcl, 50%甘油，ph8.0

     2、50 mm tris, 150 mm nacl, 50%甘油，ph8.0

     3、50 mm tris, 50%甘油，ph8.0

    或者，不透析，先超滤更换缓冲液以将咪唑浓度降到最低，最后再加等体积的灭菌甘油至终浓度50%，这样行吗？

     谢谢
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1楼 2022-07-25 11:12:35
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binbin309

铁虫 (小有名气)
直接用储存液透析，就可以把咪唑除去。你的储存液1和2没有区别。选择一种即可。氯化钠和氯化钾主要看你后边实验的要求。

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2楼2022-07-25 14:00:44
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xxx000

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by binbin309 at 2022-07-25 14:00:44
直接用储存液透析，就可以把咪唑除去。你的储存液1和2没有区别。选择一种即可。氯化钠和氯化钾主要看你后边实验的要求。

谢谢。如果不加盐，直接用储存液3透析，可以吗？会不会产生蛋白沉淀？
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3楼2022-07-26 10:27:28
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binbin309

铁虫 (小有名气)
有可能。3号没有盐溶液，盐让蛋白更稳定

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xxx000
4楼2022-07-27 17:33:50
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xxx000

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by binbin309 at 2022-07-27 17:33:50
有可能。3号没有盐溶液，盐让蛋白更稳定

谢谢
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5楼2022-07-27 17:48:44
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溜溜青

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by binbin309 at 2022-07-25 14:00:44
直接用储存液透析，就可以把咪唑除去。你的储存液1和2没有区别。选择一种即可。氯化钠和氯化钾主要看你后边实验的要求。

请问，用什么储存液可以把咪唑透析掉
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6楼2023-03-26 22:09:24
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