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712614104

新虫 (正式写手)


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这么长的大肠杆菌?求助大家
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描述:


菌种:大肠杆菌
活化:lb 14h  
表达:乳糖自诱导 20℃ 40h
抗生素:amp+kan

        第一张图是无目标酶表达(阴性对照),第二张图有目标酶表达(阳性对照)。第二张图菌液很粘稠,洗菌的时候还拉丝儿,od值偏低,且酶活低。阴性菌表达:GFP(荧光蛋白)  阳性菌表达:GFP+目标酶。
        
想问下大家这是什么情况?(是分裂受限了吗?)    另外如何解决呢?  谢谢!




这么长的大肠杆菌?求助大家


这么长的大肠杆菌?求助大家-1

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[ Last edited by 712614104 on 2022-7-24 at 11:15 ]
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yugege2009

至尊木虫 (知名作家)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
加个微信吧,我们也有类似情况。

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16楼2022-07-24 17:04:54
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712614104

新虫 (正式写手)


引用回帖:
16楼: Originally posted by yugege2009 at 2022-07-24 17:04:54
加个微信吧,我们也有类似情况。

好的,微信 wh15515159711
17楼2022-07-24 17:54:55
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ahura

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
amp抑制细胞壁合成,大肠杆菌分裂不了越来越长,我也碰到过这种情况。抗生素压力下形态变化也算正常。

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18楼2022-07-24 21:35:21
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712614104

新虫 (正式写手)


引用回帖:
18楼: Originally posted by ahura at 2022-07-24 21:35:21
amp抑制细胞壁合成,大肠杆菌分裂不了越来越长,我也碰到过这种情况。抗生素压力下形态变化也算正常。

改变amp的终浓度是否可以改善呢?谢谢

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19楼2022-07-25 08:17:32
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ahura

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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19楼: Originally posted by 712614104 at 2022-07-25 08:17:32
改变amp的终浓度是否可以改善呢?谢谢
...

应该可以,你试试,低于MIC的浓度会好些
20楼2022-07-25 09:56:47
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扑朔啊迷离

新虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我的菌昨天拍扫描也是这个样子,好多线状的,也是A+k+的抗性
21楼2022-07-25 14:49:35
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712614104

新虫 (正式写手)


引用回帖:
21楼: Originally posted by 扑朔啊迷离 at 2022-07-25 14:49:35
我的菌昨天拍扫描也是这个样子,好多线状的,也是A+k+的抗性

我打算试试降低amp浓度,然后再看看。(我原本都打算重新转化挑单克隆了)

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22楼2022-07-25 23:59:46
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扑朔啊迷离

新虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
22楼: Originally posted by 712614104 at 2022-07-25 23:59:46
我打算试试降低amp浓度,然后再看看。(我原本都打算重新转化挑单克隆了)
...

你试一下有没有效果,我在考虑要不要换骨架,把氨苄的质粒换成氯霉的质粒
23楼2022-07-26 20:36:15
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勿忘书2楼
2022-07-24 10:58   回复  
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tzynew3楼
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daifen185楼
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2022-07-24 11:24   回复  
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heyj12348楼
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gordon3999楼
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JJC@10楼
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nono200911楼
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asd_lxz14楼
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