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兰兽FMD

新虫 (初入文坛)

[求助] 毕赤酵母KM71 ppic9K蛋白分泌表达已有1人参与

最近用KM71毕赤酵母表达8KD左右小蛋白,载体用的ppic9k,用2mg/ml  G418 YPD抗性平板筛出的重组菌,做了目的基因PCR,毕赤酵母通用引物PCR并且测序都没有问题。测序的序列比对,插入的目的基因也在α分泌因子表达框内。但是在表达过程中做了很多次上清和沉淀的Tricin-sds-page和WB都没有目的条带的产生。有熟悉毕赤酵母表达的虫友能给解答一下吗或者加我微一起交流毕赤酵母表达的相关问题。V:DA25213737808
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tevejdey

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我也出现了这个问题,设计胞内表达,表达出来了,你可以破壁看看,是否在胞内有表达
2楼2022-08-03 14:47:28
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