应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 蛋白诱导表达问题
41/1返回列表
查看: 1762  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者zhaohai159将赠送您 5 个金币

zhaohai159

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白诱导表达问题 已有1人参与

所用酵母为一个酿酒酵母突变菌株，质粒为pYES2。转入酵母后蛋白诱导表达，为SD-URA培养基PH5.8加2%半乳糖，1%棉籽糖，250rpm30℃诱导表达，但经WB检测后，目的蛋白出不来，阳性对照可以出来。之前的师兄做的可以诱导出来。怎么优化诱导条件？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2022-07-20 21:51:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

期待的薛酱

捐助贵宾 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一是诱导条件不适合目的蛋白的表达，可通过改变培养基，温度，诱导剂等条件重新摸索出合适的诱导条件。
二是目的蛋白的菌种有问题，可通过涂板挑选单克隆菌落重新培养，或者质粒重新转化表达菌株等方法优化菌种。
赞一下(1人) 回复此楼
食安专业/做分子/微生物/测序相关实验，现提供各种实验试剂耗材仪器和技术服务，私详聊
2楼2022-07-21 11:08:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaohai159

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 期待的薛酱 at 2022-07-21 11:08:12
一是诱导条件不适合目的蛋白的表达，可通过改变培养基，温度，诱导剂等条件重新摸索出合适的诱导条件。
二是目的蛋白的菌种有问题，可通过涂板挑选单克隆菌落重新培养，或者质粒重新转化表达菌株等方法优化菌种。

好的，谢谢！
回复此楼
3楼2022-07-21 20:57:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaohai159

新虫 (初入文坛)
已经解决，蛋白存在跨膜结构域，将这一结构去除后成功诱导表达出

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2024-07-30 17:11:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zhaohai159 的主题更新
41/1返回列表
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 关于filecode +3 布布和一二 2026-08-07 4/200 2026-08-07 16:34 by 医学老男孩
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +3 布布和一二 2026-08-07 3/150 2026-08-07 15:09 by gltch
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[论文投稿] 十年后又回来了，论文投稿求助 +4 哈哈114477 2026-08-01 4/200 2026-08-07 14:39 by jgy194592
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +4 yang182083 2026-08-06 6/300 2026-08-07 12:43 by 虫友是什么虫
[基金申请] 面上再次挂了，太难了，躺也躺不了，倦也卷不过，小学校之殇！ +23 低垂的野花 2026-07-31 31/1550 2026-08-07 12:22 by speculiar
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] 基金中了 +11 laoda193707 2026-08-06 11/550 2026-08-07 10:54 by TT和NN
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 4/200 2026-08-05 09:59 by lfy8008
[基金申请] 有没有H口的？有收到消息的吗？ +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
[基金申请] 面上提前没消息，有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 18/900 2026-08-04 14:42 by archvillain
[基金申请] 娱乐 +4 Tide man 2026-08-03 4/200 2026-08-04 11:51 by wgch518
[基金申请] 什么时候能放榜呀？ +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭