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guying03

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[交流] 褐飞虱侧输卵管分泌蛋白可以作为RNAi的新靶点

褐飞虱侧输卵管分泌蛋白可以作为RNAi的新靶点

输卵管在动物生殖过程中起着至关重要的作用,是卵子运输的关键管道。虽然高等动物的输卵管分泌已有很好的记录,但昆虫输卵管分泌的蛋白质组学信息仍知之甚少。

输卵管是雌性生殖系统的“交通枢纽”,是卵子运输的关键管道。通过LC-MS/MS蛋白质组检测和转录组分析,鉴定了80种侧输卵管分泌蛋白。

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图 1. 雌性褐飞虱的生殖系统

并鉴定了5个基因(NlOdsp、NlOdsp1、NlOdsp2、NlOdsp3和NlOdsp4)在水稻害虫褐飞虱的输卵管中特异性表达。

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图 2. 雌性褐飞虱NlOdsp和NlOdsp1–4蛋白质的示意图



qRT-PCR分析表明,这些基因和蛋白质主要在成虫雌性生殖系统中特异表达。

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图 3. NlOdsp和NlOdsp1–4基因的时空表达模式分析

针对5个NlOdsp基因的RNAi实验表明,注射dsRNA,抑制该基因,8天后,雌性成虫的存活率(对照的3.4%-68.7%)和生殖力(对照的3.9%-57.6%)显著降低。

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图 4. RNAi抑制NlOdsp和NlOdsp1–4基因对褐飞虱存活率的影响

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图 5. RNAi抑制NlOdsp和NlOdsp1–4基因对褐飞虱雌性的生殖力和孵化率影响

此外,抑制NlOdsp1导致侧输卵管内凝胶状棕色分泌物减少,而dsNlOdsp2组的分泌物增加。

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图 6. RNAi抑制NlOdsp1–4基因6天后雌性的输卵管表型



此外,NlOdsp3是一个多效性基因,参与卵母细胞发育和卵子通过侧输卵管的运动,类似于NlOdsp在卵子运输中的作用。

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图 7. dsNlOdsp3注射后对雌性褐飞虱的影响



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图 8. RNAi处理抑制基因后侧输卵管组织学横截面的全景图像



该结果加深了我们对雌性昆虫输卵管分泌蛋白的理解,并为基于RNAi的害虫防治提供了新的靶基因。

原文链接:

https://doi.org/10.1016/j.jprot.2022.104670
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