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蚝油生菜

新虫 (小有名气)

[交流] pet28a双酶切 已有4人参与

实验室暂时只有2000的marker，marker旁边是未酶切的质粒，旁边三条泳道都是双酶切的质粒，大小和未酶切的质粒的超螺旋大小一样正常吗？

pet28a双酶切


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1楼 2022-07-14 11:29:15
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shuaibia6

金虫 (小有名气)
★
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从大小来看是正常的
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2楼2022-07-14 11:50:08
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紫魔风动

银虫 (小有名气)
★
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质粒是大提还是小提？我提的浓度一直很低
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3楼2022-07-14 17:28:20
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蚝油生菜

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 紫魔风动 at 2022-07-14 17:28:20
质粒是大提还是小提？我提的浓度一直很低

小提，试剂盒提的，pet低拷贝，稍微多点菌提
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4楼2022-07-14 17:42:35
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乌克兰跑男

铜虫 (正式写手)
★
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引用回帖:
4楼: originally posted by 蚝油生菜 at 2022-07-14 17:42:35
小提，试剂盒提的，pet低拷贝，稍微多点菌提...

质粒三个条带分别对应，底：超螺旋 中：线性 上：开环。从质粒提取质量来看可能是手法有些问题，导致质粒断裂了，所以存在线性质粒和开环质粒的情况。正常提的好的质粒应该只有超螺旋一条带，你这三个带比例都1：1：1了，或许是因为提质粒的时候太多菌导致裂解不完全。
因为质粒超螺旋的结构会比正常质粒大小跑的快一些，比实际质粒大小会小一些（小的程度取决于质粒的螺旋程度），从这个角度看做双酶切的目的是将螺旋的质粒开环，那你的条带和超螺旋的就不应该一样，而是跑的更上一些！

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我思故我在
5楼2022-08-07 03:23:52
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jinkairui123

铁虫 (正式写手)
没啥不正常的
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武汉金开瑞生物，提供核酸和蛋白的整体研究方案
6楼2022-10-20 09:18:57
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