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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 最近在做毕赤酵母蛋白诱导，总是失败，想请个好心人帮帮忙，谢谢了
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abcjlm

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by fbcjm at 2022-07-22 22:56:20
浓度是三十多ng/μI；用了二十多微升，确实有点低，我抱着侥幸心理了。因为我想如果正常的话，应该不会一个也不长吧。
老师只是给了我一些构建好的质粒进行转化，让我试试。
山梨醇水洗和四度离心的时候离心管会短 ...

https://www.thermofisher.cn/cn/z ... etting-started.html
没事的时候 看看这个
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11楼2022-07-25 11:05:38
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fbcjm

新虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by abcjlm at 2022-07-25 11:05:38
https://www.thermofisher.cn/cn/zh/home/technical-resources/technical-reference-library/protein-expression-support-center/yeast-expression-support/yeast-expression-support-getting-started.html
没事的 ...

非常感谢

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12楼2022-07-27 08:43:55
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fbcjm

新虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by abcjlm at 2022-07-25 11:05:38
https://www.thermofisher.cn/cn/zh/home/technical-resources/technical-reference-library/protein-expression-support-center/yeast-expression-support/yeast-expression-support-getting-started.html
没事的 ...

你好，在吗？有个问题想问问你

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13楼2022-07-31 10:59:08
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溜溜青

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by abcjlm at 2022-07-22 09:24:45
线性化回收后质粒的浓度是多少（电转的质粒浓度要控制好）     有没有空白对照 （9k原始质粒）      电转杯和山梨醇也要2-8度预冷    全程低温操作   
买的培养基用X33做阳性对照了吗    水浴的时候 有每隔一段时 ...

您好，电转的质粒浓度最佳浓度范围要多少，我之前用低浓度质粒转了后，尝试了几次表达，蛋白浓度总是上不去，也分析表达的过程了感觉没问题，是不是电转质粒的浓度太低了，拷贝数没上去？
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14楼2022-09-13 14:47:20
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乌克兰跑男

铜虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
送红花一朵
引用回帖:
9楼: Originally posted by fbcjm at 2022-07-22 22:56:20
浓度是三十多ng/μI；用了二十多微升，确实有点低，我抱着侥幸心理了。因为我想如果正常的话，应该不会一个也不长吧。
老师只是给了我一些构建好的质粒进行转化，让我试试。
山梨醇水洗和四度离心的时候离心管会短 ...

加我联系方式q595562114 又遇到什么问题一起交流 看我帖子我也做的毕赤酵母

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我思故我在
15楼2022-09-14 16:35:26
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