24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 1186  |  回复: 19
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

kaixinlala

新虫 (小有名气)

[交流] 从土壤筛菌的时候,土壤加水摇匀后,需要离心吗已有3人参与

文献里都没有写离心,都是静置取上清液,但是我前面2-3代,都会比较浑浊,有一份土样很难沉淀
不知道这样影响不影响筛菌的效果
学生物的同学说需要离心,还说这个是很基础的,所以不需要写在文献里

是这样吗,恳请有经验的大神帮忙解答
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kaixinlala

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by CJL59552 at 2022-07-03 09:40:13
你那是初筛,不用离心。如果离心,你接着会问,转速是多少?离心力是多少?等等一类的问题。

那什么样的情况需要离心啊
初筛?还有复筛吗?
3楼2022-07-05 20:07:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kaixinlala

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by CJL59552 at 2022-07-06 09:45:15
初筛出来后,有可能不同的菌落长在一起了,为了进一步分离它们,需在平皿上划线(专业术语),此操作可能多次,直至纯化成单菌落。啥时候离心呢?大量收集菌体(你的目标产物是菌体,而不是代谢产物)时,需要离心 ...

我明白了,后面优化降解条件的时候,比如温度什么的,制备菌液的时候,这一步是离心的。
大神,我还有其他问题,我就用的含不含C的无机盐培养基,从土里面筛降解菌,但是筛了两三批都没有降解。最后涂板也有菌株,制备成菌液加进去,也没有降解。我想知道后面应该怎么做,继续多做几种土吗?我把能找的土都找了筛了一遍,我不知道是我试验哪里出了问题
5楼2022-07-06 10:05:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kaixinlala

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by CJL59552 at 2022-07-06 09:45:15
初筛出来后,有可能不同的菌落长在一起了,为了进一步分离它们,需在平皿上划线(专业术语),此操作可能多次,直至纯化成单菌落。啥时候离心呢?大量收集菌体(你的目标产物是菌体,而不是代谢产物)时,需要离心 ...

土壤悬浮液静置沉淀的时候,这个时间如果过长,会让菌体下沉吗?我一开始为了让上清液澄清一些,沉淀了十个小时。后面再做的时候,基本就沉淀四五个小时
6楼2022-07-06 14:45:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kaixinlala

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 耿直耿直点 at 2022-07-06 15:49:53
摇瓶摇匀的时候取样进行稀释涂布,离心会把菌体也离下来的

我用的方法是,摇匀后取上清液进行无机盐富集培养,后面再涂板。
8楼2022-07-06 16:10:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kaixinlala

新虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by CJL59552 at 2022-07-07 11:31:53
把土阴干(或低温烘干),轻轻压碎压细,直接均匀地洒在平皿上。与你的悬浮液做个对照,看看两者的菌落差别。

我筛了两批都没有降解,不知道是怎么回事,把摇菌的传代进行涂板也有菌,但是制备成菌液加进去也不降解
10楼2022-07-08 08:36:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kaixinlala

新虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by CJL59552 at 2022-07-08 09:47:32
你说的我不是太懂。我大概想了一下,给你打个比喻吧。你给食肉动物喂草,草还在,食肉动物已轮回。草就是你要降解的东西,食草动物就是你要挑选的菌种,而你挑选了狮子去吃草。...

就是我的土样不行呗,是不是筛菌的时候,需要做很多处理,加大样本量
12楼2022-07-08 10:24:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kaixinlala

新虫 (小有名气)

引用回帖:
16楼: Originally posted by momo莫模 at 2022-07-09 09:10:59
最好先富集培养一段时间再筛菌

对的,在土壤里面的降解半衰期在100多天。你说的富集培养是传代培养吗
17楼2022-07-09 13:19:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kaixinlala

新虫 (小有名气)

引用回帖:
16楼: Originally posted by momo莫模 at 2022-07-09 09:10:59
最好先富集培养一段时间再筛菌

就是我前面传代培养的时候,培养基农药也没有降解
18楼2022-07-09 13:20:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kaixinlala

新虫 (小有名气)

引用回帖:
19楼: Originally posted by momo莫模 at 2022-07-09 17:42:15
不是传代,要先在培养基加上筛选压力,然后培养一段时间再去筛选。这么说吧,1亿个菌里有10是你要的,和1亿个菌里10万个你想要的,你觉得哪个筛选出的概率大?
...

明白了,我的土壤一直打着药,是不是你说的富集
20楼2022-07-09 19:13:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 kaixinlala 的主题更新
普通表情 高级回复(可上传附件)
信息提示
请填处理意见