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籽諾season

新虫 (正式写手)

[求助] 凝胶层析峰过宽已有1人参与

凝胶层析峰特别宽,A值增长的特别慢,降低的也特别慢,想问下什么原因,如何解决

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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有没有可能是以下原因:
(1)上样体积过大 (超过柱体积5%);
(2)洗脱流速过低(导致蛋白在柱内扩散);
(3)分子筛上下不均一?

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行至水穷处,坐看云起时
2楼2022-06-30 08:42:57
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籽諾season

新虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by pennchem at 2022-06-30 08:42:57
有没有可能是以下原因:
(1)上样体积过大 (超过柱体积5%);
(2)洗脱流速过低(导致蛋白在柱内扩散);
(3)分子筛上下不均一?

我用的柱子是1.6*30 装柱19.5cm 上样2ml 应该只超了一点点影响也会这么大吗 还有流速是0.5ml/min 之前用了恒流泵1ml/min但是一直出气泡!撤掉恒流泵发现它本身管里的流速只有一半所以就没用恒流泵了 不知道该怎么提高流速了 柱子已经是重新装了一次了 应该均一吧

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3楼2022-06-30 09:01:37
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