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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 革兰氏阳性菌菌落pcr用什么酶呀
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wc卫成

铁虫 (小有名气)

[交流] 革兰氏阳性菌菌落pcr用什么酶呀 已有2人参与

最近做敲除实验，用的是takara普通 taq酶做大肠杆菌菌落pcr很顺利，现在做革兰氏阳性菌，p不出来，想问问什么酶好用，

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1楼 2022-06-25 23:23:37
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山舞银蛇

铁杆木虫 (正式写手)
★
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裂解条件不够，试试把95℃预变性的步骤增加温度和时间，比如98℃ 5min，或者95℃ 15min
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核酸提取与Taqman诊断
2楼2022-06-27 08:24:55
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xzx018

铁杆木虫 (著名写手)
★
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加点dmso，takara的酶已经很好了，可以考虑别的因素。假如有takara的extaq可以试试，这个酶比普通的效果好

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3楼2022-06-27 08:26:36
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wc卫成

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xzx018 at 2022-06-27 08:26:36
加点dmso，takara的酶已经很好了，可以考虑别的因素。假如有takara的extaq可以试试，这个酶比普通的效果好

好的，谢谢，我用95-10min已经扩出来了，可能是原来20ul做革兰氏阳性菌菌落pcr不行，50ul体系就做出来了

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4楼2022-06-27 13:11:00
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