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如果验证钙离子结合蛋白可以结合钙离子
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| 我利用原核表达将一个预测的钙离子结合蛋白通过组氨酸标签纯化出来，目的是为了验证该蛋白是否可以结合钙离子！我的初步想法是在一部分蛋白中加入钙离子，另外一部分加入钙离子螯合剂EGTA，然后通过SDS-PAGE电泳分辨！因为蛋白结合钙离子后构象会发生变化，电泳速度也会有变化！本人目前困惑的是，是在纯化的过程中加入这两种物质呢还是在纯化之后的蛋白溶液中添加呢？EGTA在常规的条件下就可以螯合钙离子吗？请各位专家多多指点，谢谢 |
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michaelwuqingyu
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2楼2009-09-10 10:43:59