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湖大打工仔

铜虫 (小有名气)

[求助] 提RNA时异丙醇沉淀可以换成乙醇吗已有2人参与

提RNA时异丙醇沉淀可以换成乙醇吗(他们的功能是什么)
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未闻花开

新虫 (小有名气)

看你液体总体积,较少的话可以用乙醇。体积较大的话用异丙醇,异丙醇沉淀核酸时需要的体积较少,但是异丙醇在洗涤时较难去除。

发自小木虫Android客户端
2楼2022-06-20 22:47:26
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atikou

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
RNA提取过程中,加入氯仿萃取后,取得的上清,可以选择加入异丙醇或无水乙醇进行沉淀,效果差不多。但是异丙醇的体积是上清体积的0.8-1.2倍左右,无水乙醇的体积是上清体积的2倍。他们的功能都是能够析出RNA,使得RNA能够被离心富集下来。使用异丙醇沉淀后,要用乙醇洗涤1-2次,因为异丙醇难以挥发,乙醇洗涤可以洗去高盐离子等,且容易挥发晾干。
----------------来自深圳市易基因的回复
3楼2022-06-22 11:49:38
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971731043

新虫 (职业作家)

4楼2022-10-06 21:47:12
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tybo

木虫 (著名写手)


【答案】应助回帖

异丙醇和酒精都是有机溶剂,一般来讲,提取RNA的时候一开始都要用异丙醇沉淀,因为异丙醇沉淀的效果要好一些,但最后大多用酒精沉淀,因为酒精容易挥发,对下游的实验影响小
异丙醇比较疏水,能很更好地沉淀核酸,用乙醇的目的是去盐,它比异丙醇更亲水,所以能去掉一些盐离子。有时还用70%的乙醇洗样品也是为了增加盐的溶解度。
在沉淀RNA时可用乙醇或异丙醇,乙醇的极性要强于异丙醇,所以一般用2倍体积乙醇沉淀,但在多糖、蛋白含量高时,用异丙醇沉淀可部分克服这种污染,尤其用异丙醇在室温下沉淀对摆脱多糖、杂蛋白污染更为有效。
如果楼主有什么其它问题,欢迎和我们上海领骏生物技术人员沟通;www.lnjnbio.com
5楼2023-11-24 13:39:43
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天照小星星

新虫 (小有名气)

可以用专用的rna提取试剂盒  加我QQ2589149676

发自小木虫Android客户端
6楼2023-11-26 22:21:08
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