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eric201212

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[交流] E.COLI表达的小分子蛋白不经过肾脏代谢而是经过肝脏代谢，到底哪里出了问题呢？

蛋白带有His标签，25kD左右，镍柱纯化，250 mM咪唑洗脱下来的，电泳和wb都做了没什么问题，但是在小鼠体内代谢监测的时候发现大部分还是通过肝脏代谢，理论来说应该通过肾脏代谢（用酵母系统表达的同一个蛋白也确认了是通过肾脏代谢的），难道是咪唑的原因吗？会让蛋白聚集？

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1楼 2022-06-18 23:20:44

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fuyuandj86

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★
eric201212(金币+1): 谢谢参与

读不懂。蛋白进入肠胃后不是应该被蛋白酶消化掉吗？然后被消化后的氨基酸首先就去了肝脏。
还是说你把蛋白直接静脉注射到血液了？肾脏又不是血浆蛋白分解的主要场所，为啥会在肾脏代谢？血浆里的一部分蛋白就是在肝脏里被分解的，这也没问题呀？
你是想说肾脏的蛋白过滤功能或蛋白重吸收功能出问题了吗？

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3楼2022-06-19 19:17:28

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eric201212

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3楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2022-06-19 19:17:28
读不懂。蛋白进入肠胃后不是应该被蛋白酶消化掉吗？然后被消化后的氨基酸首先就去了肝脏。
还是说你把蛋白直接静脉注射到血液了？肾脏又不是血浆蛋白分解的主要场所，为啥会在肾脏代谢？血浆里的一部分蛋白就是在肝 ...

不好意思是我没说清楚，我是通过静脉注射进入小鼠体内的，按照理论来说的话如果蛋白或者纳米粒子很小的话一般是应该通过肾脏-膀胱代谢的，不会留在肝脏里面，我在想是不是蛋白出现了二聚体，怎么检测蛋白是不是二聚体呢？又或者怎么将二聚体的蛋白分开来

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4楼2022-06-22 11:39:19

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fuyuandj86

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eric201212: 金币+3 2022-06-23 21:32:55

引用回帖:

4楼: Originally posted by eric201212 at 2022-06-22 11:39:19
不好意思是我没说清楚，我是通过静脉注射进入小鼠体内的，按照理论来说的话如果蛋白或者纳米粒子很小的话一般是应该通过肾脏-膀胱代谢的，不会留在肝脏里面，我在想是不是蛋白出现了二聚体，怎么检测蛋白是不是二聚 ...

蛋白如果可以随意透过肾脏的话就出蛋白尿了，健康状态下尿液中的蛋白很少的，而且尿中的蛋白分子量都较小。
二聚体检测方法，可以做个尺寸排阻色谱可以看看，如果是二硫键介导的二聚体可以跑非还原胶。

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5楼2022-06-23 12:19:17

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